人血浆中瑞格列奈和二甲双胍的定量分析及制剂生物等效性研究

摘要

背景：瑞格列奈是一种短效口服降糖药，通过刺激胰岛β细胞促进内源性胰岛素分泌而降低血糖，临床上用于2型糖尿病的治疗。二甲双胍为双胍类口服降糖药，通过增加外周组织对葡萄糖的摄取和利用，提高组织对胰岛素的敏感性，并降低肝脏葡萄糖生成，减少肝糖输出，临床上用于2型糖尿病的治疗。目前尚无同时测定人血浆中瑞格列奈和二甲双胍的方法报道。
　　目的：建立液相色谱-串联质谱法，同时测定人血浆中的瑞格列奈和二甲双胍，并应用于中国健康受试者体内瑞格列奈和二甲双胍复方制剂的生物等效性评价和药动学研究。
　　方法：以d5-瑞格列奈和d6-二甲双胍为内标，血浆样品经乙腈沉淀蛋白，以乙腈-10mM醋酸铵为流动相梯度洗脱，选用Venusil ASB C18柱(150×4.6mm，5μm)进行色谱分离，单个样品色谱运行时间为7.5 min。质谱检测采用大气压化学电离源，在正离子模式下进行多重反应监测（MRM）。用于定量分析的离子反应分别为m/z453→m/z230（瑞格列奈）和m/z458→230（d5-瑞格列奈，内标），m/z130→60（二甲双胍），m/z136→60（d6-二甲双胍，内标）。
　　结果：测定人血浆中瑞格列奈标准曲线的线性范围为0.2～60.0ng·mL-1，二甲双胍的线性范围为4～1000 ng·mL-1。两者的日内、日间精密度(RSD)均小于11.5％，准确度(RE)在-1.3～5.5％以内。此法应用于中国人瑞格列奈和二甲双胍不同复方制剂生物等效性评价和药动学研究，受试制剂与参比制剂的瑞格列奈的Cmax，AUC0-t，AUC0-∞几何均值比的90％置信区间(CI)分别为91.0％～116.2％，88.1％～98.8％，88.4％～99.2％，受试制剂与参比制剂的二甲双胍的Cmax，AUC0-t，AUC0-∞几何均值比的90％置信区间(CI)分别为96.4％～112.1％，92.8％～101.3％，92.6％～101.1％，结果显示两种制剂具有生物等效性。
　　结论：该方法同时测定人血浆中的瑞格列奈和二甲双胍。两待测物均采用稳定同位素内标，适用于瑞格列奈和二甲双胍不同复方制剂生物等效性评价及药动学研究。

目录

声明

摘要

前言

1．1 瑞格列奈的药理作用与药动学性质

1．2 二甲双胍的药理作用与药动学性质

1．3 瑞格列奈与二甲双胍的联合应用

1．4 瑞格列奈与二甲双胍的生物样品分析方法

1．5 生物等效性评价

1．6 实验目的和研究计划

第二章 生物样品分析方法的建立和确证

2．1 材料与方法

2．1．1 药品和试剂

2．1．2 仪器和设备

2．2 分析方法的建立

2．2．1 质谱条件优化

2．2．2 色谱条件优化

2．2．3 样品预处理方法优化

2．2．4 溶液的配制

2．3 分析方法确证

2．3．1 方法选择性

2．3．2 标准曲线和定量下限

2．3．3 方法的精密度与准确度

2．3．4 稀释试验

2．3．5 基质效应考察

2．3．6 血浆样品处理回收率

2．3．7 稳定性考察

2．4 讨论

第三章 瑞格列奈盐酸二甲双胍片的人体生物等效性及药动学评价

3．1 实验目的

3．2 临床试验部分

3．2．1 试验设计

3．2．2 受试者的选择

3．2．3 受试药品及来源

3．2．4 血样采集

3．3 生物样品分析及数据统计

3．3．1 血浆样品分析

3．3．2 已测样品再分析

3．3．3 数据处理及统计

3．4 临床试验结果及评价

3．5 讨论

第四章 结论

参考文献

致谢

个人简历

附录