人血浆中替米沙坦的LC-MS法快速测定及其制剂的生物等效性研究

摘要

目的:建立快速测定人血浆中替米沙坦的HPLC-ESI-MS法,测定志愿者口服替米沙坦片剂40 mg后的血药浓度,并对供试制剂和参比制剂的生物等效性进行评价.方法:血浆样品以乙腈沉淀蛋白,直接将上清液酸化后进行HPLC-ESI-MS分析,色谱柱为Lichrospher C18(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为10 mmol/L乙酸铵缓冲液(pH 3.5)-甲醇(9∶91,V/V),内标为坎地沙坦酯,检测离子(m/z):515.5(替米沙坦[M+H+])、423.4(内标碎离子),裂解电压为120 V.20名健康志愿者交叉口服供试片和参比片后,采血样,进行HPLC-ESI-MS分析,计算主要药动学参数及相对生物利用度,以判断生物等效性.结果:在0.3012～602.4 μg/L范围内,替米沙坦与内标的峰面积比值与浓度呈良好的线性关系,1个样品的测定时间仅需3.5 min,1天能测定300多个样品.供试制剂及参比制剂的t1/2分别为(23.3±5.6) h和(24.7±4.2) h,达峰浓度分别为(209.8±125.9) μg/L和(219.2±119.0) μg/L.达峰时间分别为(1.7±0.7) h和(1.8±0.5) h.以AUC0-96计算,供试制剂的相对生物利用度为(100.5±8.3)%.结论:建立的HPLC-ESI-MS分析方法快速、灵敏、准确、简便.临床实验的药动学统计数据表明,本实验所用的两种制剂生物等效.