大豆胚芽中异黄酮提取研究

摘要

该文研究了从大豆胚芽中提取和纯化总异黄酮的方法与工艺,包括总异黄酮的初步提取和异黄酮提取物的固体酸水解两个主要过程.在大豆胚芽总异黄酮初步提取条件优化实验中,以单因素实验方法优化了四个影响因素:提取温度、提取时间、溶剂用量、溶剂浓度.以胚芽中总异黄酮提取率和提取的选择性为指标,确定60％乙醇为提取溶剂、提取温度50℃、提取次数三次、每次提取的液固比为6:1、三次的提取时间分别为60min、10min、10min,三次总提取率为92％.在异黄酮固体酸水解实验中,选择南开大学化工厂的D72强酸性阳离子交换树脂作为固体酸催化剂.经过两次固定床水解反应,染料木素、大豆黄素和黄豆黄素等三种异黄酮转化率可达90％.实验研究了温度、甲醇水配比、进料配比以及接触时间对游离型异黄酮转化率的影响.结果表明,在实验温度范围内(60~70℃),温度变化对genistein和glycitein影响较明显,温度升高转化率增大;温度变化对daidzein的转化率影响不大;接触时间越长,反应的转化率越高,并逐渐趋向平衡值;甲醇水配比为1:2有利于水解反应;溶剂比例增大,三种异黄酮转化率都增大,溶剂比例增大到一定程度转化率变化不明显.异黄酮精制过程中,探索了柱层析、溶剂萃取、溶剂沉淀等方法,最终异黄酮含量可达40％,对胚芽异黄酮收率50％左右.建立了总异黄酮的分析方法和游离态异黄酮的HPLC分析方法.

目录

文摘

英文文摘

前言

第一章文献综述

1.1异黄酮简介

1.1.1分子结构及其分布

1.1.2物理性质

1.1.3化学性质

1.1.3生理活性

1.2提取工艺

1.2.1甲醇提取

1.2.2丙酮提取

1.2.3乙醇提取

1.2.4碱提取酸沉淀法

1.2.5 CO2超临界萃取

1.3异黄酮精制

1.3.1吸附法

1.3.2超滤膜与吸附树脂相结合

1.3.3吸附与溶剂萃取相结合

1.3.4柱层析法

1.3.5离子交换法

1.4异黄酮的水解及纯化

1.4.1丙二酰基葡萄糖苷的水解

1.4.2 β-葡萄糖苷的水解

1.5大豆异黄酮提取分离工艺的综合评价

1.6分析方法

1.6.1薄板层析法

1.6.2紫外分光光度计法

1.6.3HPLC双标样分子系数法

1.6.4 HPLC四标样法分子系数法

1.6.5各形式异黄酮的测定

第二章总异黄酮提取

2.1实验材料

2.1.1材料

2.1.2仪器

2.1.3实验装置

2.2提取步骤

2.3提取条件的优化

2.3.1提取时间的影响

2.3.2乙醇浓度的选择

2.3.3液固比和提取次数确定

2.3.4提取温度确定

2.4小结

第三章异黄酮的水解与纯化

3.1萃取脱油

3.1.1实验器材

3.1.2实验步骤

3.1.3结果与讨论

3.2乙醇沉淀除杂

3.3溶剂萃取

3.3.1强酸性树脂吸附水解

3.3.2盐酸水解

3.3.3乙醚萃取

3.3.4氯仿萃取

3.3.5乙酸乙酯萃取

3.3.6溶剂萃取比较

3.4柱层析精制工艺

3.4.1实验器材

3.4.1实验步骤

3.4.2HP-20流出曲线

3.4.3强碱3号流出曲线

3.4.4 D4006流出曲线

3.5丙酮沉淀

3.5.1丙酮多次沉淀除杂

3.5.2丙酮与正丁醇结合使用

3.6小结

第四章异黄酮糖苷的固定床水解

4.1实验材料

4.1.1材料

4.1.2仪器

4.1.3实验装置

. 4.2实验步骤

4.3一次水解反应

4.3.1空隙率的测定

4.3.2原料与溶剂比例的确定

4.3.3温度的影响

4.3.4甲醇配比影响

4.4二次水解反应

4.5树脂吸附影响

4.6小结

第五章结论

附录一基础数据

附录二分析方法

参考文献

致谢