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双生病毒卫星DNA的βC1基因缺失突变体的致病性及稳定性测定和缺失突变体的利用

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缩略语表

第一篇文献综述

第一章双生病毒的致病机制研究进展

1双生病毒的分类及其基因组结构

2双生病毒与小分子DNA形成病害复合体

3双生病毒的系统侵染过程

4双生病毒的致病因子及其可能的作用途径

第二章植物病毒作为载体系统的应用进展

1植物病毒作为外源基因表达载体系统的应用

2植物病毒诱导的基因沉默及在植物基因功能研究中的应用

第二篇研究内容

第一章材料与方法

1材料

2方法

第二章中国番茄黄化曲叶病毒卫星DNAβ的βC1基因缺失突变体的致病性及其稳定性

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

第三章烟草曲茎病毒卫星DNAβ的βC1基因缺失突变体的致病性及其稳定性

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

第四章利用中国番茄黄化曲叶病毒卫星DNAβ的βC1基因缺失突变体进行外源基因表达

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

第五章烟草曲茎病毒的卫星DNA沉默载体构建及其利用

1材料与方法

2结果

3讨论

全文小结

参考文献

附录A:常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器

附录B:常用缓冲液及培养基配方

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摘要

本论文对缺失βC1基因的DNAβ分子的致病性及稳定性进行了研究,并利用缺失βC1基因的DNAβ分子进行了外源基因的表达及基因沉默研究。   对中国番茄黄化曲叶病毒Y10分离物(TYLCCNV-Y10)DNAβ上的βC1基因进行了功能鉴定。  对烟草曲茎病毒Y35分离物(TbCSV-Y35)DNAβ上的βC1基因也进行了功能鉴定。     采用置换βC1基因并引入多克隆位点的策略构建了基于TbCSVDNAβ的沉默载体TbCSV-Y35DNA△C1β。该载体可以抑制转基因GFP和植物内源功能基因Su的表达,在所测试的本氏烟和心叶烟上都能有效地诱导Su基因沉默;该载体可以分别与异源双生病毒TYLCCNV或赛葵黄脉病毒(MYVV)有效诱导基因沉默。

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