hTERT基因在骨髓增生异常综合征中的表达及其在三氧化二砷诱导MUTZ-1细胞凋亡中的作用研究

摘要

为探索As<,2>O<,3>对MDS细胞的影响及其机理,我们将As2O3作用于MDS-RAEB细胞株MUTZ-1细胞.为进一步阐明As<,2>O<,3>启动MUTZ-1细胞凋亡的通路,我们采用Western blot法检测caspase8及caspase3蛋白的表达,发现2-8μM As<,2>O<,3>作用MUTZ-1细胞24h,可出现caspase3和caspase8大小分别为20kDa及42 kDa的活性条带.进一步检测caspase 3的作用底物PARP蛋白,同样可检测到其大小为89kDa的活性片段,说明caspase8、caspase3及PARP的激活是As<,2>O<,3>诱导MUTZ-1细胞凋亡的重要途径.我们认为:(1)MDS患者高表达hTERT,hTERT在MDS的发生、发展中可能具有重要作用,hTERT是独立的预后因素,其表达提示预后不良.(2)MDS患者高表达WT1,WT1同样是预后不良的指征.同时WT1在MDS中更可能是hTERT的转录促进子而非抑制子.(3)2μM As<,2>O<,3>在体外可显著抑制MUTZ-1细胞增殖并诱导细胞凋亡,因此可能是MDS有效的治疗药物.(4)As<,2>O<,3>通过两条途径诱导MUTZ-1细胞凋亡,其一为caspase8、caspase3及PARP的激活;另一为通过抑制NF-κB、Sp-1及Ap1等转录因子的活性抑制hTERT表达.(5)As<,2>O<,3>通过抑制NF-κB活性继而抑制hTERT表达诱导MUTZ-1细胞凋亡途径与caspase8激活诱导细胞凋亡途径是两条相互独立的通路.(6)最后我们认为,hTERT是MDS治疗的重要作用靶点,抑制hTERT表达是As<,2>O<,3>诱导MDS细胞凋亡的重要机制,可能为MDS的治疗提供了一种新思路.

目录

前言

第一部分HTERT与WT1基因MRNA在骨髓增生异常综合征患者中的表达研究

材料与方法

结果

讨论

第二部分三氧化二砷诱导MUTZ-1细胞凋亡作用的研究

材料与方法

结果

讨论

第三部分三氧化二砷抑制MUTZ-1细胞HTERT表达及其机制研究

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

综述一骨髓增生异常综合征的染色体及分子异常

综述二JAK-STATS通路在正常与异常造血中的作用

致谢