产α-半乳糖苷酶乳酸菌的筛选和应用

摘要

α—半乳糖苷酶(α—galactosidase—EC．3.2.1.22)是一种外切糖苷酶类，具有特异性水解低聚糖中的α—半乳糖苷键，广泛应用于大豆加工行业用来消除α—半乳糖苷类寡糖。本论文从产α—半乳糖苷酶乳酸菌的筛选开始，研究了α—半乳糖苷酶的性质，乳酸菌的高密度发酵以及产α—半乳糖苷酶乳酸菌在豆奶发酵中的应用。论文主要研究结果如下：
　　 (1)从发酵乳制品、益生菌制品、泡菜和实验室保藏的乳酸菌株为原始材料筛选产α—半乳糖苷酶的乳酸菌。通过平板上显色反应作为初筛依据，结合液体培养复筛，获得1株产α—半乳糖苷酶酶活较高的菌株，其最大酶活达到17.35U/mL，经生理生化试验初步鉴定为发酵乳杆菌。该发酵乳杆菌α—半乳糖苷酶的最适温度为50℃，且50℃保温2小时，酶活仍保持约60％；最适pH为5.8，在pH5.0～7.0时，酶稳定性良好。
　　 (2)对发酵乳杆菌进行了高密度培养，主要研究了发酵乳杆菌生长繁殖的环境条件(温度、接种量、起始pH)和培养基组成对其生长的影响。优化后确定了发酵乳杆菌最适生长条件为：起始pH值为6.0，培养温度为37℃，接种量为5％，培养时间为16h—18h。培养基配比为：以MRS培养基为基础，添加2.0％葡萄糖、0.5％牛肉膏、0.5％胰酶解酪朊、0．1％玉米浆，其他成分不变；该菌在此优化条件和增菌培养基中，菌数可达到3.05×1010cfu/mL。
　　 (3)通过研究发酵乳杆菌在豆乳中的生长特性、产酸特性，初步探讨了发酵乳杆菌酸豆乳的最佳原料配比为：脱脂奶粉4％，接种量为5％，乳糖1％，蔗糖6％。在此条件下发酵的酸豆乳，酸甜适合、颜色均匀、组织状态较好；其中的水苏糖和棉籽糖降解率分别到达了72.31％和68.95％。

目录

文摘

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致谢

第1章文献综述

1.1α-半乳糖苷酶

1.2微生物α-半乳糖苷酶的研究进展

1.2.1产α-半乳糖苷酶的微生物

1.2.2微生物α-半乳糖苷酶的生理生化特性

1.2.3 α-半乳糖苷酶的应用

1.3乳酸菌源α-半乳糖苷酶在豆乳中的应用

1.3.1大豆酸乳研究进展

1.3.2大豆酸乳的开发现状及存在的问题

1.3.3大豆酸乳的营养保健功能

1.4研究背景及内容

1.4.1 研究背景

1.4.2研究内容

第2章产α-半乳糖苷酶乳酸菌的筛选

2.1材料与方法

2.1.1材料

2.1.2方法

2.2结果与讨论

2.2.1菌株分离

2.2.2产α-半乳糖苷酶乳酸菌的筛选

2.2.3菌种鉴定

2.3结论

第3章发酵乳杆菌α-半乳糖苷酶酶学性质研究

3.1材料与方法

3.1.1材料

3.1.2方法

3.2结果与分析

3.2.1 α-半乳糖苷酶酶学性质

3.2.2 α-半乳糖苷酶对低聚糖的降解特性

3.3结论

第4章发酵乳杆菌高密度培养的研究

4.1材料

4.1.1材料

4.2方法

4.2.1菌种活化方法

4.2.2测定方法

4.2.3发酵乳杆菌生长和产酸特性研究

4.2.4发酵乳杆菌传代稳定性研究

4.2.5高密度培养

4.3结果与分析

4.3.1发酵乳杆菌La-Y1生长和产酸特性

4.3.2 发酵乳杆菌传La-Y1传代稳定性

4.3.3La-Y1高密度培养

4.3.4基础培养基的筛选结果

4.3.5 基础培养基优化

4.4结论

第5章发酵乳杆菌La-Y1在豆乳发酵中的应用研究

5.1材料与方法

5.1.1材料

5.1.2主要仪器

5.1.3方法

5.2结果与分析

5.2.1发酵乳杆菌发酵剂活力测定

5.2.2 La-Y1在豆乳中的生长特性

5.2.3发酵酸豆乳配方优化试验设计结果

5.2.4 La-Y1发酵酸豆乳的制作

5.3结论与建议

5.3.1结论

5.3.2建议

第6章本论文的主要成果及后续研究设想

6.1本论文的主要研究成果

6.2后续研究展望

参考文献

作者简历及在学期间所取得的科研成果