雷公藤中具有醌还原酶诱导活性的化学成分的发现

摘要

雷公藤(TripterygiumwilfordiiHook.f.)系卫矛科雷公藤属植物,是一种有着悠久药用历史的中药,用于治疗类风湿性关节炎等自身免疫性疾病。
　　 细胞二相代谢酶在细胞致癌剂和其他有害氧化剂的代谢中具有重要作用,二相酶水平的上调被认为是预防癌症发生的主要机制,醌还原酶(QR)是体内重要的二相酶之一,因而对醌还原酶具有诱导活性的成分被认为在肿瘤起始阶段具有潜在的预防作用。
　　 本文采用传统的活性追踪的分离方法和LC-MS技术结合的手段对雷公藤的化学成分进行了研究,并用细胞筛选方法进行了活性验证。主要研究内容及成果如下:
　　 1.采用柱色谱对雷公藤根的95％乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位进行了分离纯化。运用IR、UV、ESI-MS、HRESI-MS、1HNMR、13CNMR、HSQC、HMBC、1H-1HCOSY、NOESY等波谱手段和理化性质鉴定了其中21个化合物的结构,分别为triptobenzeneY(1)、wilforsininesC-H(2-7)、triptobenzeneH(8)、triptininB(9)、ejap-3(10)、celastrineA(11)、1α,2α,6β,8α,15-pentacetoxy-9α-benzoyloxy-β-agarofuran(12)、ejap-4(13)、1α,2α,6β,8α,13-tetraacetoxy-9α-benzoyloxy-2α-hydroxy-β-dihydroagarofuran(14)、triptobenzeneA(15)、blumenolC(16)、celangulatinF(17)、wilforsinineB(18)、2β,6α,12-triacetoxy-1β,9β-bis(benzoyloxy)-8β-(β-nicotinoyloxy)-β-dihydroagarofuran(19)、2β,5α,7β-triacetoxy-11-isobutyryloxy-8α-(3-furancrbonyloxy)-4α-hydroxy-1β-nicotinoyloxy-dihydroagarofuran(20)和wilfosinineA(21),其中化合物1-7为新化合物。
　　 2.建立了雷公藤95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位中具有醌还原酶诱导活性的亲电分子的液质联用快速发现方法。对雷公藤的95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位与还原型谷胱甘肽反应前后化学成分的变化进行LC-MS分析,推测出了2个具有QR诱导作用的亲电化合物。
　　 3.用小鼠Hepa1c1c7细胞系对雷公藤95%L醇提取物的各萃取部位及化学成分进行了醌还原酶诱导活性的筛选。