铁皮石斛多糖提取工艺优化及其可育性分析

摘要

铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)为兰科植物石斛属，是国家二级保护濒危植物，同时被列入《国家重点保护野生药材物种名录》。铁皮石斛是常用的名贵中草药材，自古以来就拥有“药中黄金”之美誉最早记载于《神农本草经》，具有2000多年的应用历史。多糖成分是铁皮石斛具有免疫增强和抗肿瘤作用的主要活性成分，因此铁皮石斛中的多糖成分引起了许多研究人员的关注。
　　本课题主要利用响应曲面法分析以及优化铁皮石斛多糖提取的最优工艺，同时测定铁皮石斛不同生长时期、不同部位的多糖含量，而且针对铁皮石斛自花结实率低的现象，探索其原因。本研究主要取得了一下几方面的研究成果:
　　1.采用响应曲面法，在单因素实验的基础上，选取影响铁皮石斛多糖提取的温度、时间、料液比等3个因素，利用design expert8.05b软件设计实验方案，利用软件对实验结果进行方差及显著性分析，得到铁皮石斛多糖提取的最优工艺为提取温度100℃，提取时间2.17h，料液比1∶156.43，理论计算多糖得率达到28.97％
　　2.测定铁皮石斛不同部位的多糖含量。分别选取铁皮石斛的花瓣、茎部以及叶片，测定其多糖含量，茎部多糖含量最高为28.84％，花瓣和叶片分别为22.57％和23.73％。
　　3.测定不同生长时期铁皮石斛的多糖含量。针对生长3个月的铁皮石斛原球茎、6个月的原球茎、12个月生铁皮石斛组培苗以及36个月铁皮石斛栽培苗，分别测定其多糖含量，测得其多糖含量依次为4.13％、7.48％、14.62％和27.83％
　　4.以多糖含量为主要指标，从36个不同产地的铁皮石斛株系中选出品质较高的株系，命名为ZJ。分别按照同朵花、同茎同花序不同花、同茎不同花序花和同株系不同茎花这4种方式对ZJ-1进行授粉，统计座果率。结果依次为6.3％,6.9％，22.9％和53.0％。对不同生长期的花药活力和柱头的可授性进行测定，发现柱头大概在开花第6天即可成熟，而花药的成熟则严重滞后于柱头的成熟。

目录

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致谢

摘要

第一章 石斛多糖的研究进展

1．1．多糖含量

1．2 多糖提取工艺

1．2．1 热水浸提法

1．2．2 酶解法

1．3 多糖的化学结构

1．4 药理活性

1．4．1 免疫调节作用

1．4．2 抗氧化活性

1．4．3 抗肿瘤作用

1．5 存在问题及展望

第二章 响应曲面法在多糖提取中的应用

2．1 响应曲面法简介

2．1．1 试验因素选取和单因素最优取值点确定

2．1．2 响应面试验设计

2．1．3 构建数学模型及检验模型

2．1．4 响应曲面最优化

2．1．5 验证最佳条件

2．2 响应曲面法在多糖提取中的应用

2．3 讨论

第三章 利用响应曲面法优化铁皮石斛多糖提取工艺

3．1．材料和方法

3．1．1 材料

3．1．2 方法

3．2．实验设计

3．2．1 单因素试验设计

3．2．2 响应曲面试验设计

3．3 实验结果与分析

3．3．1 葡萄糖标准曲线

3．3．2 水提法提取铁皮石斛多糖的单因素实验

3．3．3 响应曲面法优化提取工艺

3．4 讨论

第四章 不同部位、不同生长时期铁皮石斛多糖含量测定

4．1 材料与方法

4．1．1 材料

4．1．2 方法

4．2 实验结果与分析

4．2．1 不同部位铁皮石斛多糖含量测定

4．2．2 不同生长时期铁皮石斛多糖含量测定

4．3 讨论

第五章 铁皮石斛可育性分析

5．1 材料与试剂

5．1．1 材料

5．1．2 试剂

5．1．3 仪器

5．2 试验方法

5．2．1 铁皮石斛座果率分析

5．2．2 花器显微观察

5．2．3 花器扫描电镜观察

5．2．4 花药活力测定

5．2．5 柱头可授性测定

5．3 实验结果

5．3．1 铁皮石斛座果率分析

5．3．2 花器的显微观察

5．3．3 花药活力及柱头可授性测定

5．4 讨论

结论

参考文献

个人简历