瑞士乳杆菌发酵液Ns-FS干预皮肤光衰老的作用及机制研究

摘要

皮肤作为机体与外界接触的第一道屏障，也是人体最先衰老的器官。持续的紫外线照射可使皮肤细胞不断累积自由基和过氧化物质，同时削弱体内自身的抗氧化防御系统，从而引发皮肤的光老化、炎症，色素过量沉积甚至会导致黑色素瘤等皮肤癌症的形成。近些年来，乳酸菌的健康促进作用已经得到公认。其中，乳酸菌的抗氧化性在一些报道中也得到了实验证实。然而，有关乳酸菌或乳酸菌发酵产物干预紫外线引起的皮肤光衰老或光损伤的研究还非常少见。本研究主要探讨瑞士乳杆菌NS-8发酵液(NS-FS)干预皮肤光氧化作用，以及相关的分子机制。本课题主要分为体外和体内两个部分。在体外，通过ABST+和DPPH清除实验，我们发现NS-FS具有显著的的清除自由基的能力。并且在角质细胞HaCat中，进一步验证NS-FS对于皮肤的抗氧化作用。结果证明NS-FS的局部给药可NS-FS可以显著抑制Sin-1诱导生成的ROS，说明NS-FS具有较强的抗氧化能力。在体内，我们建立了紫外线UVB诱导的无毛小鼠SKH-1模型，以有效缓解SKH-1无毛小鼠的皮肤光老化，如减少UVB引起的表皮增厚和跨膜失水量(TEWL)，降低皮肤的脂质过氧化水平。另外，NS-FS改善了皮肤内抗过氧化酶（如过氧化氢酶CAT和谷胱甘肽过氧化酶GPx）的活性及蛋白表达水平。在进一步的机制研究中，我们发现NS-FS可以促进Nrf-2蛋白的活化，因此激发皮肤细胞的抗氧化活力，从而达到抵抗光老化的效果。通过本研究的结果，我们证实了瑞士乳杆菌发酵液对于皮肤光老化的干预作用及可能机制，为尝试开发出益生菌相关的美容护肤产品提供了前期的基础。

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致谢

摘要

缩略词表

1 引言

1．1 皮肤的光衰老

1．1．1 紫外线引起皮肤光衰老

1．1．2 皮肤光衰老机制

1．1．3 益生菌用于治疗皮肤老化

1．2 益生菌的抗氧化作用

1．3 NS-8乳杆菌的发现与功能

1．3．1 NS-8乳杆菌的发现

1．3．2 益生菌减轻其他光衰老症状

2 NS-8乳酸菌发酵液(NS-FS)的抗氧化作用体外实验

2．1 实验内容

2．1．1 NS-FS的制备

2．1．2 B16F10细胞培养

2．1．3 NS-FS对B16F10细胞活力的影响

2．1．4 NS-FS清除细胞内ABTS+自由基能力检测

2．1．5 NS-FS清除细胞内DPPH自由基能力检测

2．1．6 NS-FS清除细胞内ROS能力检测

2．2 实验结果

2．2．1 制备NS-8乳杆菌发酵液(NS．FS)

2．2．2 NS-FS对细胞活力影响不显著

2．2．2 NS-FS显著清除细胞内自由基

2．2．2 NS-FS显著清除细胞内ROS

2．3 实验讨论

3 体内实验

3．1 实验内容

3．1．1 无毛小鼠光衰老模型的建立

3．1．2 NS-8乳酸菌发酵液对抗氧化相关物质和相关酶活性的影响

3．2 实验结果

3．2．1 SKH-1无毛小鼠皮肤光衰老模型建立完成

3．2．2 小鼠皮肤内氧化反应相关物质含量变化

3．3 实验讨论

4 NS-FS抗氧化机制的研究

4．1 NS-FS对Nrf-2蛋白的影响

4．1．1 实验内容

4．1．2 实验结果

4．1．3 实验讨论

5 总结与讨论

参考文献