黄芩苷对癫痫模型大鼠行为学及对脑组织中 HMGB1/NF-κB表达的影响

摘要

第一部分 HMGB1、NF-κB在癫痫点燃大鼠脑组织中的表达
目的：研究 HMGB1、NF-κB在氯化锂-匹罗卡品诱导的颞叶癫痫大鼠模型海马组织中表达的变化。方法：1. 成年雄性 SD 大鼠,随机分为空白对照组与模型组(亚组：24h 、72h、1w, 2w,1m,2m。各组 n=5),经腹腔给予氯化锂-匹罗卡品注射,构建颞叶癫痫模型。2. 运用免疫荧光双标和免疫印迹研究HMGB1和NF-κB在癫痫大鼠脑组织中的表达。结果：1.免疫印迹显示,HMGB1 在癫痫大鼠海马组织匀浆中表达较空白对照组升高,平均光密度值差异具有统计学意义,P<0.05；免疫荧光显示,HMGB1主要分布在癫痫大鼠神经元,在神经胶质细胞少量分布。2.免疫荧光显示,与空白对照组比较,NF-κB在癫痫大鼠脑组织中主要分布于细胞核。
结论：在颞叶癫痫(Temporal lobe epilepsy,TLE)大鼠模型中, 大鼠痫性发作后引起 HMGB1 表达增高、NF-κB 活化增强,提示 HMGB1 和NF-κB参与了癫痫的发生。
第二部分 黄芩苷干预对癫痫大鼠的行为学以及对HMGB1、NF-κB表达的影响
目的：通过观察黄芩苷干预组与模型组大鼠癫痫发作潜伏期及发作级别,了解黄芩苷对大鼠痫性发作的影响,检测 HMGB1、NF-κB 的表达,推测黄芩苷影响大鼠癫痫发生的潜在机制。方法：1.行为学观察：成年雄性 SD 大鼠,随机分为模型组、黄芩苷低剂量干预组、黄芩苷高剂量干预组(各组n=8)；在给予匹罗卡品造模前30min,分别给予大鼠黄芩苷低剂量100mg/kg和高剂量200mg/kg腹腔注射,观察癫痫大鼠行为学改变。2. 在海人酸单侧侧脑室注射和氯化锂-匹罗卡品腹腔注射,建立的颞叶癫痫大鼠模型中,运用免疫印迹对比模型组、黄芩苷干预组(亚组：6h,24h 、72h、1w。各组 n=5)中 HMGB1 在癫痫大鼠脑组织中的表达。在氯化锂-匹罗卡品介导的颞叶癫痫大鼠模型中,运用免疫组化对比研究HMGB1在癫痫大鼠脑组织切片中的阳性细胞数。氯化锂-匹罗卡品介导的颞叶癫痫大鼠模型中,运用免疫印迹和免疫荧光对比研究NF-κB在癫痫大鼠脑组织中的活化情况。结果：1. 与模型组对比,黄芩苷干预组中出现 RacineⅣ-Ⅴ级癫痫发作大鼠的潜伏期明显延长,且组间有明显改变,差异有统计学意义(P<0.05)；匹罗卡品腹腔注射后,60 分钟观察期内黄芩苷干预组癫痫大鼠发作级别较模型组降低。2. 在海人酸单侧侧脑室注射和氯化锂-匹罗卡品腹腔注射的颞叶癫痫大鼠模型中,免疫印迹显示黄芩苷干预后,HMGB1在各时间点癫痫大鼠海马组织匀浆中表达较模型组降低,组间平均光密度值差异具有统计学意义,P<0.05；在氯化锂-匹罗卡品介导的颞叶癫痫大鼠模型中,免疫组化结果显示黄芩苷干预后HMGB1在癫痫大鼠脑组织切片中的阳性细胞数较模型组减少,差异具有统计学意义,P<0.05。3. 在氯化锂-匹罗卡品介导的颞叶癫痫大鼠模型中,免疫印迹显示黄芩苷干预后, NF-κB在癫痫大鼠海马细胞核提取物中的表达较模型组降低,平均光密度值差异具有统计学意义,P<0.05；免疫荧光显示黄芩苷干预组中NF-κB由细胞浆进入细胞核较模型组减少。
结论：有效剂量黄芩苷干预后可明显延长大鼠痫性发作潜伏期和降低发作级别。提示黄芩苷对癫痫发作有部分修饰作用。黄芩苷干预后癫痫大鼠脑组织中HMGB1表达下调、NF-κB活化降低,推测黄芩苷影响大鼠的痫性发作可能与其参与调节了癫痫潜在治疗靶点HMGB1/NF-κB通路表达有关。

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第一部分 HMGB1、NF-κB在癫痫点燃大鼠脑组织中的表达

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

第二部分 黄芩苷干预对癫痫大鼠的行为学以及对HMGB1、NF-κB表达的影响

前言

实验方法

结果

讨论

结论

参考文献

英汉缩略语名词对照

致谢

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