不同剂量黄芩苷对氯化锂—匹罗卡品诱导癫痫持续状态大鼠行为学及海马kir4.1蛋白表达的影响

摘要

目的:(1)建立氯化锂-匹罗卡品诱导癫痫持续状态(Lithium-Pilocarpineinduced status epileptitus，Li-Pilo SE)模型，比较研究不同剂量黄芩苷预处理对氯化锂-匹罗卡品诱导的癫痫持续状态模型大鼠行为学影响，以探索黄芩苷对该模型行为学影响的最佳干预剂量;(2)研究黄芩苷对氯化锂-匹罗卡品诱导的癫痫持续状态模型大鼠kir4.1蛋白表达的影响及可能的抗癫痫作用机制。
　　方法:(1)清洁级的8-10周龄雄性SD大鼠随机分为空白对照组(n=5)、癫痫模型组(n=12)、黄芩苷100、200、400、800mg/kg干预组（每组n=12）。癫痫模型组和黄芩苷干预组经腹腔注射氯化锂-匹罗卡品诱导氯化锂-匹罗卡品癫痫急性期模型，黄芩苷干预组分别在造模前30分钟给予黄芩苷（100，200，400，800mg/kg）腹腔注射干预，癫痫模型组和空白对照组同时给与等量的生理盐水腹腔注射，观察各个实验组大鼠癫痫发作级别、潜伏期;(2)按照第一部分的方法，分别设置空白对照组、癫痫模型组、黄芩苷（最佳剂量）干预组所需动物模型，并分别于SE后1、3天处死，制作蛋白免疫印迹实验标本，采用蛋白免疫印迹(western-blot)方法对比各实验组大鼠海马组织中kir4.1蛋白的表达。
　　结果:(1)癫痫行为学变化:与癫痫模型组比较，不同剂量黄芩苷干预组大鼠达到Racine分级Ⅳ级-Ⅴ级发作潜伏期明显延长，且差异有统计学意义(P＜0.01);不同剂量黄芩苷干预组间潜伏期差异无统计学意义(P＞0.05);与癫痫模型组相比，不同剂量黄芩苷干预组大鼠癫痫发作Ⅳ-Ⅴ级大鼠发生率降低，黄芩苷(100，200，400，800mg/kg)干预组和癫痫模型组相比癫痫发作Ⅳ-Ⅴ级大鼠发生率有统计学差异(P＜0.05);不同剂量黄芩苷干预组间癫痫发作Ⅳ-Ⅴ级大鼠发生率无统计学差异(P＞0.05);(2)免疫印迹法显示，癫痫模型组大鼠海马组织kir4.1蛋白表达在SE后1、3天较空白对照组明显下调，组间平均光密度比值差异有统计学意义(P＜0.01)，黄芩苷200mg/kg干预组kir4.1蛋白表达在SE后1、3天较癫痫模型组明显上调，组间平均光密度比值差异有统计学意义(P＜0.01)。
　　结论:(1)不同剂量黄芩苷干预可以明显延长氯化锂-匹罗卡品致痫大鼠癫痫发作（Ⅳ级-Ⅴ级）潜伏期及降低癫痫发作Ⅳ-Ⅴ级发生率，虽然各剂量组黄芩苷干预后各组间癫痫发作（Ⅳ级-Ⅴ级）潜伏期和大鼠癫痫发作Ⅳ-Ⅴ级发生率统计学无差异，但从柱状图上可见200mg/kg癫痫发作潜伏期有明显延长趋势，且增加剂量至400mg/kg、800mg/kg后潜伏期不再延长，且有降低趋势，可能因为样本量小而排出统计学差异，推测200mg/kg为可能最佳有效剂量，且有明显的抗癫痫作用;(2)大鼠癫痫发作后kir4.1蛋白表达明显降低，给与黄芩苷预处理抑制了kir4.1蛋白表达降低趋势，使kir4.1蛋白表达明显上调，因此，黄芩苷对氯化锂-匹罗卡品急性期模型癫痫持续状态的抗癫痫作用可能是多靶点共同作用的结果，但对海马kir4.1蛋白表达的上调可能是其重要作用机制之一。

目录

摘要

第一部分 不同剂量黄芩苷对氯化锂-匹罗卡品诱导癫痫持续状态大鼠行为学影响

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

第二部分 研究黄芩苷对氯化锂-匹罗卡品诱导癫痫持续状态模型大鼠kir4．1蛋白的表达影响

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

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