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BMPR-IB基因作为新疆几种绵羊多胎性能候选基因的研究

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独创性声明及关于学位论文使用授权的说明

第一章绵羊多胎基因的研究进展

第二章BMPR-IB基因的PCR-RFLP分析研究

第三章Tetra-primer ARMS-PCR在BMPR-IB基因突变检测中的应用

参考文献:

致谢

作者简介

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摘要

本研究以绵羊BMPR-IB基因作为多胎候选基因,采用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,对策勒羊(44只)、多浪羊(49只)、湖羊(32只)、中国美利奴羊(新疆型)多胎类型(40只)以及中国美利奴羊(新疆型)(47只)进行了分析研究。结果表明,在策勒羊、多浪羊、中国美利奴羊(新疆型)多胎类型和湖羊等品种中都存在和BooroolaMerino羊相同的BMPR-IB基因的突变(A746G),而在中国美利奴羊(新疆型)中没有发现相应的突变。其中,策勒羊突变纯合子(BB)、杂合子(B+)和野生型(++)的基因型频率分别是0.16、0.48和0.36;在多浪羊中++、B+基因型频率分别为0.65和0.35,没有发现BB基因型个体;湖羊以BB基因型为主,基因型频率为0.97;中国美利奴羊(新疆型)多胎类型以B+基因型为主,BB、B+和++基因型频率分别为0.05、0.7和0.25,与产羔数关联分析表明,BB基因型母羊和B+、++基因型母羊平均产羔数差异极显著(p<0.01),推断BMPR-IB基因是控制中国美利奴羊(新疆型)多胎类型多胎性能的主效基因。经X2适合性检验表明,策勒羊、多浪羊、湖羊、中国美利奴羊(新疆型)该位点处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),中国美利奴羊(新疆型)多胎类型该基因位点显著偏离Hardy-Weinberg平衡(X2=8.4028,P<0.05)。独立性检验表明,策勒羊、多浪羊、中国美利奴羊(新疆型)多胎类型、湖羊与中国美利奴羊(新疆型)间BMPR-IB基因型分布差异极显著(P<0.001),多浪羊与中国美利奴羊(新疆型)多胎类型间BMPR-IB基因型分布差异极显著(P<0.001),湖羊与策勒羊、中国美利奴羊(新疆型)多胎类型、多浪羊BMPR-IB基因型分布差异极显著。 由于PCR-RFLP技术存在检测步骤比较繁琐,需要专一性的酶消化,大批样品的检测花费较高等缺点,本研究利用四引物扩增受阻突变体系PCR(Tetra-primerARMS-PCR)技术对策勒羊、多浪羊的BMPR-IB基因进行了检测,和PCR-RFLP技术的检测结果完全一致,证明了Tetra-primerARMSPCR技术的可行性。该技术检测程序简单,检测速度快且节省试验成本,为以后该基因位点以及其他SNP位点的快速检测打下了基础。

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