乌鲁木齐地区奶牛隐性乳房炎及金黄色葡萄球菌Fnbp基因原核表达的初步研究

摘要

本试验对乌鲁木齐周边地区6个集约化奶牛场和4家散户隐性乳房炎发病情况进行了调查，对奶牛隐性乳房炎病例中金黄色葡萄球菌进行了分离、鉴定，并对其抗药性进行了初步研究。
　　 在调查中，隐性乳房炎的平均头阳性率和乳区阳性率分别为32.75%和15.11%，奶样中金黄色葡萄球菌的平均头分离率和乳区分离率分别为15.11%和6.32%。药物敏感性试验表明，在所调查的集约化牛场和散户中，隐性乳房炎病例中金黄色葡萄球菌药物敏感性基本相同，各牛场所分离菌株均对丁胺卡那、左氧氟沙星敏感。
　　 根据GenBank上发表的金黄色葡萄球菌Fnbp基因序列，设计合成一对引物，以金黄色葡萄球菌分离株的DNA为模板，采用 PCR方法扩增Fnbp基因，得到1654bp的目的片段，将其插入到pMD18-T 载体中，构建pMD18-T-Fnbp重组质粒，将其转入到E.coliDH5α中，进行酶切鉴定并测序验证。然后将目的片段与原核表达载体pGEX-4T-3连接，构建重组质粒pGEX-4T-Fnbp，将其转化到E.coliBL21中，进行酶切鉴定并测序验证。其阳性重组质粒经IPTG诱导表达，通过SDS-PAGE电泳分析可得表达产物与预期大小相符，约61.2KD。这为建立金黄色葡萄球菌免疫学诊断方法，研究针对金黄色葡萄球菌性奶牛乳房炎的治疗和候选亚单位疫苗的研制提供了理论依据，奠定了基础。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略表

声明

第1章 综述

第2章 乌鲁木齐地区奶牛隐性乳房炎金黄色葡萄球菌的初步分离、鉴定

第3章 金黄色葡萄球菌Fnbp基因克隆及原核表达的初步研究

第4章 结论

参考文献

附 录

致 谢

作者简历