新疆部分地区牛支原体的血清学调查及病原分离鉴定

摘要

为了初步了解牛支原体病的发生和感染情况。对235份牛血清用双抗体夹心ELISA方法，进行了牛支原体病的抗体检测。结果显示，检出牛支原体阳性血清37份，阳性率为15.7％。该结果表明，牛支原体病在调查地存在并且在部分地区感染率较高。
　　采集阳性血清对应的鼻拭子，用PPLO培养基培养，盲传3代，发现有“煎蛋样”的菌落生长，挑取单个菌落再进行纯培养;纯培养物进行革兰氏染色，着色不良;姬姆萨染色，呈淡紫色;狄氏鉴别染色，呈现深蓝色中心。初步怀疑分离菌为牛支原体。
　　对疑似牛支原体菌做进一步鉴定:生化反应鉴定:菌株对洋地黄皂苷敏感，发酵葡萄糖，不水解尿素和精氨酸，结果显示该菌符合牛支原体的生化特性。PCR鉴定:采用酚氯仿方法提取培养物的DNA，使用牛支原体16S rRNA通用引物进行PCR扩增，获得预期310 bp大小的片段，该PCR扩增产物送测序公司测序，获得296 bp大小的片段，用DNA Star软件进行该菌与GenBank上的牛支原体的16S rRNA序列的同源性比较。结果显示，该菌与GenBank中牛支原体株（登录号:NR-036946）、（登录号:AY526883）和（登录号:AF332753）16S rRNA序列的同源性很高，分别达到了98.6％，98.2％，97.5％。遗传进化分析表明，该分离株为独立株，与牛支原体（登录号:NR-036946）合为一支。

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摘要

英文缩写词表

第1章 绪论

1．1 病原学

1．2 流行病学

1．3 诊断

1．4 防治措施

1．5 国内外研究现状

1．6 研究背景及意义

第2章 牛支原体的血清学调查

2．1 材料

2．2 方法

2．3 结果

2．4 讨论

2．5 小结

第3章 牛支原体的病原分离鉴定

3．1 材料

3．2 方法

3．3 结果

3．4 讨论

3．5 小结

第4章 结论

附录

参考文献

致谢

作者简介