完整型及截短型人胰岛素样生长因子Ⅰ基因的克隆及其表达

摘要

人胰岛素样生长因子1（insulin-like growth factorⅠ,IGF-1)是一个由70个氨基酸组成的碱性多肽,其截短型比完整型的N端少了三个氨基酸（甘氨酸、脯氨酸、谷氨酸）.IGF-1是一种多功能细胞增殖调控因子,它在骨重建、胚胎发育、神经生长等方面有重要作用,在糖尿病、侏儒症、骨质疏松等多种疾病的治疗中都有重要的应用价值.在IGF-1的研究过程中,用人体材料（血或组织等）作为制备来源是有限的和不可取的,且血清中的IGF-1含量非常低.因此,为了获得大量的IGF-1产品,基因工程是可取的途径.我们利用外显子拼接法从人的基因组DNA中扩增了编码完整型及截短型人IGF-1基因成熟肽的DNA片段,并将其克隆至pGEM-T载体中;经测离证明正确后,又构建了表达载体pGEX-3X-IGF-1及pGEX-3X-des（1-3）IGF-1,在大肠杆菌中进行了表达研究.经过IPTG（异丙基硫代-β-半乳糖苷）诱导表达后,通过SDS-PAGE分析表明含有重组质粒的菌株可表达出分子量约为32KD的GST-IGF-1和GST-des(1-3)IGF-1融合蛋白.

目录

摘要

前言

实验流程

材料与方法

结果

讨论

结论

致谢

参考文献

附录

综述