阴道加德纳菌与细菌性阴道病相关性研究——分离培养、药敏试验、流行病学调查

摘要

背景和目的阴道加德纳菌(Gardnerellavaginalis，GV)是一种革兰阴性小杆菌或变异的球样小杆菌，是1955年由Gardner和Dukes在一例排出灰白色恶臭分泌物的妇女阴道中发现的，并于1980年被命名为Gardnerellavaginalis。近年来研究发现，在细菌性阴道病(Bacterialvaginosis，BV)的微生物菌群中GV处于优势地位，含量明显高于其他非正常菌群。GV不仅可导致BV，而且还可引起多种疾病及并发症如：绒毛膜羊膜炎、输卵管炎、子宫内膜炎、子宫颈癌、子宫颈炎，妇女产后菌血症，膀胱炎等。此外，GV与沙眼衣原体、解脲支原体等常见病菌双重或多重感染也较多见。GV还能明显刺激人类免疫缺陷病毒(HIV)在单核—巨噬细胞系统、淋巴细胞中的表达，与HIV的传播率增高有关。 该菌可以通过性传播，但由于临床症状不典型，不易被发现，故在性活跃人群中高发，部分病情迁延不愈，对妇女健康及社会公共健康影响很大。因此探讨GV的培养方法及体外抗菌素活性研究就显得非常有临床意义。为此，本课题从GV的分离培养方法、药敏试验及其与BV相关性等方面进行研究，为临床检测及诊治提供依据。 方法(1)GV分离培养：将标本接种在BBC血培养皿上，置37℃5％CO2温箱中培养。挑取培养48h后的菌落进行革兰氏染色、氧化酶试验、触酶试验、淀粉水解试验、棉子糖发酵试验及马尿酸水解试验。(2)GV药敏试验：通过K-B纸片法对GV进行青霉素G、四环素、环丙沙星、克林霉素、甲硝唑等药物的体外药敏试验。(3)GV与BV的相关性：用Amsel标准诊断BV(其中线索细胞的检查用吖啶橙染色法、革兰氏染色、生理盐水三种方法)分析GV与BV的相关性及用吖啶橙染色法检测线索细胞的可行性。 结果(1)GV分离培养：在BBC血培养皿上，37℃5％CO2条件下培养出灰白、半透明似露滴状菌落。革兰氏染色为阴性或染色不定的球样小杆菌，氧化酶试验阴性，触酶试验阴性，淀粉水解试验阳性，棉子糖水解试验阴性，马尿酸水解试验阳性。在临床采集的285份标本中，有66份阴道分泌物通过培养，鉴定出GV；(2)GV药敏试验：66株临床分离的GV对四环素、环丙沙星、克林霉素的敏感率分别为：81.81％，74.24％，86.36％。对青霉素G、甲硝唑的耐药率分别为16.67％和42.42％；(3)GV与BV相关性：在285名女性中共有58人患有细菌性阴道病，患病率为20.35％。其中就诊于性病科的48人，患病率为23.53％。健康女性中10人，患病率为12.34％(x2=4.47，P＜0.05)，两者差异有统计学意义；在BV组和非BV组，GV的检出例数分别为31例(53.45％)，53例(15.41％)，经统计学分析x2=37.55，P＜0.01，两者差异有统计学意义；AO染色法与革兰氏染色法在检查线索细胞方面一致性尚可(Kappa=0.6944)； 结论(1)在含兔血的BBC血培养皿上，5％CO2，37℃条件下48h后可以培养出阴道加德纳菌；(2)体外药物敏感性实验表明，GV对四环素、克林霉素、环丙沙星的敏感度较高，试验结果与国内文献报道相一致。某些GV菌株已经对青霉素G、甲硝唑两种药物产生了耐药；(3)性病组的BV患病率高于健康体检组；BV组的GV检出率高于健康体检组；性伴数≥2个者的BV患病率高于性伴数≤1个者；性伴个数≥2个的BV患者除患BV外，还伴随不同性传播感染(sexuallytransmittedinfections，STI)的情况出现；(4)吖啶橙染色法与革兰氏染色法在检测线索细胞方面没有差别。

目录

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英文缩略语表

前言

第一部分阴道加德纳菌的分离培养及药敏试验

第二部分阴道加德纳菌与细菌性阴道病的相关性研究

结论

参考文献

致谢

附录 GV感染情况调查表