胆道闭锁Kasai术后肝脏改变与肝脏纤维化研究

摘要

目的：
　　1.探讨胆道闭锁（Biliary atresia，BA）患儿 Kasai手术后自体肝的形态及结构改变，分析其与Kasai术后肝脏损伤程度及胆管炎之间的关系；
　　2.研究胆道闭锁患儿的自体肝组织细胞表面糖蛋白14（CD14），血管内皮生长因子34（CD34），转化生长因子β1（TGF-β1）在肝组织中的表达，及其在肝纤维化中的作用。
　　方法：
　　1.收集2012年5月至2013年12月期间天津市第一中心医院胆道闭锁患儿Kasai术后行肝移植手术的自体肝脏标本16例为实验组，其中男10例，女6例，同时收集天津市儿童医院16例胆道闭锁患儿行Kasai手术时肝脏活检标本为阳性对照组，其中男11例，女5例。观察胆道闭锁患儿Kasai术后肝脏病理变化特点，并简单分析对胆管炎发生的影响。采用HE和免疫组化技术等检测肝脏纤维化程度、胆管及血管的增生情况、肝细胞损伤情况以及炎症细胞的浸润情况，观察Kasai术后病理改变。
　　2.选取2013年1月至2014年1月天津市儿童医院BA患儿术中肝活检标本（Kasai组）、天津市第一中心医院BA患儿接受肝移植自体肝组织（移植组）、天津市儿童医院胆管扩张症患儿术中肝活检标本（扩张组，作为对照组），每组15例，术中留取肝组织。进行 HE及免疫组化染色检测三种蛋白在肝组织中表达及组织定位情况，分析其与肝纤维化之间的关系。应用图像分析软件（Image-Pro-Plus）分别计算CD14，TGF-β1积分光密度值（IOD），CD34阳性表达面积（Area），SPSS17.0软件统计分析 CD14，TGF-β1，CD34之间表达差异及其相关性。
　　结果：
　　1.实验组中生后出现黄疸时间为0~15天，行Kasai手术时间为44~105天，出现胆管炎的频次为1~6次，肝移植距离Kasai手术后时间5~67月。阳性对照组中肝活检的肝脏标本外观普遍增大，淤胆严重，质地中等；HE和免疫组化结果显示肝脏纤维化分级介于II~IV级之间，汇管区胆栓情况介于0~I级之间，汇管区血管增生情况介于III~IV级之间，胆管增生介于I~III级之间。实验组中肝脏外观多数呈现部分段、叶萎缩情况，也有部分肝脏标本呈现肥厚改变；肝脏纤维化分级都属于IV级，汇管区胆栓情况I-II级之间，汇管区血管增生情况IV级，胆管增生III~IV级之间。
　　2. CD14表达于肝髓窦内皮细胞，成纤维细胞，炎细胞；TGF-β1表达于成纤维细胞、胆管上皮细胞、炎细胞；CD34表达于汇管区血管内皮细胞。与对照组比较，实验组三种蛋白表达增加，从肝纤维化I级至IV级中，CD14、TGF-β1蛋白表达量呈逐渐下降趋势，CD34表达逐步增多。实验组中三种蛋白在肝组织表达差异有统计学意义（P<0.05），其中CD14与TGF-β1肝组织表达相关性显著， TGF-β1、CD34肝组织表达呈正相关(P<0.01)。
　　结论：
　　1.胆道闭锁患儿Kasai术后肝脏损伤受Kasai手术时间影响，早期行Kasai术肝组织血管/胆管增生不明显，肝小叶有轻微淤胆；手术较晚的患儿肝脏胆汁淤积严重，假小叶、桥接纤维化，胆管增生明显。胆道闭锁Kasai术后接受肝移植的患儿终末期肝脏纤维化及淤胆严重，胆管，血管增生严重，汇管区增宽，炎细胞浸润灶。
　　2. BA肝纤维化进展期CD14，TGF-β1表达逐渐增加，参与BA肝纤维化过程，并对BA肝硬化形成起到推动作用。TGF-β1与CD34在三组肝组织中显著正相关，可能在纤维化中相互作用，在纤维化进展中起到一定的作用。到移植终末期，各种细胞缺失，纤维组织增多，三组蛋白表达逐渐下降。

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缩略语

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

一、胆道闭锁Kasai术后肝脏病理改变与胆管炎关系研究

1.1对象和方法

1.2 结 果

1.3 讨论

1.4小结

二、胆道闭锁肝脏TGF-β1、CD14等表达与肝纤维化关系研究

2.1对象与方法

2.2结果

2.3讨论

2.4小结

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述: 胆道闭锁Kasai术后肝脏形态改变与预后关系研究进展

致谢