ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡中PCSK9与炎症因子的关系以及替格瑞洛干预的影响

摘要

目的：
　　观察氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）凋亡中前蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK9）与炎症因子表达的关系，以及替格瑞洛（Ticagrelor）干预的影响。
　　方法：
　　用50μg/ml的ox-LDL处理HUVECs不同时间（0h,12h,24h,36h,48h），运用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、酶联免疫吸附剂测定（ELISA）的检测方法分别检测PCSK9、白细胞介素6（IL-6）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、C反应蛋白（CRP）的mRNA和蛋白的表达，以及核因子-κB（NF-κB）核位移。应用Lipofectamine2000转染100nmol/L的PCSK9小分子干扰RNA（PCSK9 siRNA）进入HUVECs6h后，再加入ox-LDL50μg/ml处理24h，以RT-PCR、ELISA的方法分别检测PCSK9、IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP的mRNA和蛋白的表达，以及NF-κB核位移。用50μg/ml的ox-LDL及不同浓度的Ticagrelor（40、60μmol/L）处理HUVECs24h，以RT-PCR、ELISA的方法分别检测PCSK9、IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP的mRNA和蛋白的表达，以及NF-κB核位移。
　　结果：
　　在一定时间范围内，随着ox-LDL处理HUVECs时间的不断增加，PCSK9、IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP的 mRNA和蛋白的表达，以及NF-κB核位移逐渐增加(P<0.05)。PCSK9 siRNA转染组，PCSK9、IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP的mRNA和蛋白的表达，以及 NF-κB核位移较阴性转染组（NC）组明显降低(P<0.05)。Ticagrelor能明显降低PCSK9、IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP的mRNA和蛋白的表达，以及NF-κB核位移，呈浓度依赖性(P<0.05)。
　　结论：
　　调亡的HUVECs中存在着PCSK9基因的表达，其表达的程度及炎症因子释放的浓度与内皮细胞调亡程度有关；PCSK9 siRNA能够抑制ox-LDL诱导的HUVECs炎症因子的表达， PCSK9可能参与了炎症反应的调节；Ticagrelor能够抑制ox-LDL诱导的HUVECs凋亡中PCSK9与炎症因子的表达，Ticagrelor的抗炎作用可能与其抑制PCSK9的机制有关。

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缩略语/符号说明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

一、ox-LDL对人脐静脉内皮细胞PCSK9及炎症因子表达的影响

1.1对象和方法

1.2结果

1.3讨论

1.4小结

二、PCSK9 siRNA对人脐静脉内皮细胞PCSK9及炎症因子表达的影响

2.1对象和方法

2.2结果

2.3讨论

2.4小结

三、Ticagrelor对人脐静脉内皮细胞PCSK9及炎症因子表达的影响

3.1对象和方法

3.2结果

3.3讨论

3.4小结

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述：PSCK9在动脉粥样硬化中的作用

致谢