盐酸小檗碱对2型糖尿病大鼠炎症介质及胰腺β细胞形态的影响

摘要

目的：观察盐酸小檗碱对2型糖尿病大鼠血清炎症因子水平的干预，以及对血糖、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰腺β细胞形态学的影响，探讨盐酸小檗碱对改善糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用机理，为临床防治胰岛素抵抗，减缓糖尿病并发症发生发展提供理论依据。
　　 方法：健康雄性SD大鼠60只，体重180-200g，在普通饲料喂养1周后，按体重随机(电脑随机号码法)分为正常对照组15只和造模组45只。其中正常对照组给予普通饲料喂养，造模组给予高脂高热量饲料(20％猪油、10％蔗糖、70％基础饲料)喂养，连续8周。8周后，禁食、水12h，造模组给予一次性腹腔注射2％链脲佐菌素(STZ)溶液40mg/Kg，建立具有外周IR的2型糖尿病大鼠模型：正常对照组腹腔注射同剂量柠檬酸.柠檬酸钠缓冲液。造模结束后第三天目内眦取血检测空腹血糖、空腹血胰岛素水平，计算胰岛素抵抗指数，选择空腹血糖>16.7mmol/L，的动物为造模成功。模型组45只大鼠中造模成功者38只，随机分为病理对照组(n=1.2)、盐酸小檗碱治疗组(n=13)和盐酸二甲双胍治疗组(n=13)。分组后进行药物治疗4周。正常对照组：以自来水灌胃，同时给予普通饲料喂养；病理对照组：以自来水灌胃，同时给予高脂高热量饲料；盐酸小檗碱治疗组：以盐酸小檗碱180mg/kg·d灌胃，同时予高脂高热量饲料；盐酸二甲双胍治疗组：以盐酸二甲双胍180mg/kg·d灌胃，同时给予高脂高热量饲料。分别于高糖高脂饲料喂养8周后、腹腔注射2％STZ72h后及药物治疗4周后，三次采血。禁食、水12h，以2％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉大鼠，目内眦静脉丛取血，以真空采血管储存血液。离心分离血清、血浆后将血清、血浆样品分装于1.5ml的冻存管中，-70℃冻存备用，以检测血糖、血胰岛素、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等指标，并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。最后一次采血后，迅速解剖大鼠，取新鲜胰腺标本，浸泡于固定液中固定，将标本进行常规HE染色切片，光镜观察病理学表现，同时进行免疫组化染色后镜下观察。
　　 结果：1.造模成功后大鼠血糖、血清胰岛素水平与造模前相比显著升高(p<0.01)，较同期正常对照组明显升高(p<0.01)：血清CRP、IL-6、TNF-α水平较造模前及同期正常对照组亦显著增高(p<0.05)；造模后大鼠胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)较前明显增高，差异具有显著性(P<0.01)。
　　 2.予以药物干预4周后，盐酸小檗碱治疗组大鼠血糖、血清胰岛素较干预前明显降低(p<0.01)，较同期病理对照组明显降低(p<0.01)；血清IL-6、FNF-α水平较干预前明显降低(p<0.05)，较同期病理对照组明显降低(p<0.05)，血清CRP较干预前有所下降，差异无显著性(p>0.05)，较同期病理对照组明显降低，差异具有显著性(p<0.05)；盐酸二甲双胍治疗组大鼠血糖、血清胰岛素较干预前明显降低(p<0.01)，较同期病理对照组明显降低(p<0.01)：血清TNF-α水平较干预前明显降低(p<0.05)，较同期病理对照组明显降低(p<0.05)，血清CRP、IL-6较干预前组下降，差异无显著性(p>0.05)，较同期模型对照差异有显著性意义(p<0.05)；药物干预后，两组HOMA-IR水平较干预前及同期病理对照组明显下降(p<0.05)。
　　 3.盐酸小檗碱治疗组和盐酸二甲双胍治疗组均可显著降低血糖、血清胰岛素，改善胰岛素抵抗，同时均有降低血清TNF-α作用(p<0.05)，两组间比较差异无显著性(p>0.05)；盐酸小檗碱治疗组较盐酸二甲双胍治疗组对IL-6降低作用强且差异具有显著性(p<0.05)；两组对血清CRP均无明显降低作用，差异不具有显著性(p>0.05)。
　　 4.光镜下HE染色和免疫组化染色后观察胰腺β细胞形态发现，病理对照组较正常对照组，胰岛内β细胞有严重的脱颗粒现象，少数细胞塌陷、缺失，排列不规则，胰岛素染色颗粒较少，β细胞松散排列，分布不规则，胞浆中胰岛素染色颗粒明显减少，使细胞呈空虚状态。盐酸小檗碱治疗组和盐酸二甲双胍治疗组较病理对照组均有不同程度的改善。
　　 结论：2型糖尿病大鼠血清炎症因子(CRP、TNF-α、IL-6)较正常大鼠显著升高，胰岛素抵抗指数显著升高。盐酸小檗碱和盐酸二甲双胍均可降低2型糖尿病大鼠血中的炎症因子，盐酸小檗碱作用更明显。盐酸小檗碱可通过降低2型糖尿病大鼠血清炎症因子水平而起到降低血糖、改善胰岛素抵抗的作用。
　　 目的：观察盐酸小檗碱对2型糖尿病患者血清炎症因子水平的干预，以及对血糖、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的影响，探讨盐酸小檗碱对改善糖尿病患者胰岛素抵抗的作用机理，为临床防治胰岛素抵抗，减缓糖尿病并发症发生发展提供依据。
　　 方法：新近诊断2型糖尿病患者65例，分为盐酸小檗碱治疗组(n=33)和盐酸二甲双胍治疗组(n=32)，每2周复诊一次，疗程为3个月。观察指标包括：(1)主要临床症状、空腹血糖(FBG)、餐后2小时血糖(PBG)、空腹胰岛素(FINS)、糖化红蛋白(HbA1c)、C反应蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)；(2)安全性指标：血常规、尿常规、心电图、肝、肾功能、不良反应等；(3)一般临床资料：血脂(TCH，TG)、血压、体重指数(BMI)、腰臀之比(WHR)。
　　 结果：盐酸小檗碱可显著降低2型糖尿病患者血清TNF-a水平(P<0.05)，可使胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)显著降低(p<0.05)，对CRP及IL-6有一定降低作用，但无明显统计学意义(P>0.05)。盐酸二甲双胍治疗组TNF-a、CRP及IL-6经治疗后有所下降，差异无显著意义(P>0.05)，胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)显著降低(p<0.05)。两组血糖均控制良好，治疗后，FPG、PBG、FINS和HbA1c较治疗前明显下降，差异有显著性意义(p<0.05)，TCH、TG、BMI无明显改变，各项指标比较，两组无明显差别(P>0.05)。
　　 结论：盐酸小檗碱可显著降低血清TNF-a，改善患者胰岛素抵抗状态。盐酸小檗碱通过降低炎症因子改善胰岛素的敏感性。

目录

论文说明：英文缩略词表

声明

第一部分盐酸小檗碱对2型糖尿病大鼠血清炎症因子及胰腺β细胞形态的影响

摘要

引言

材料和方法

1 实验材料

2 实验方法

结果

1 一般情况

体重变化情况

3 实验性2型糖尿病IR大鼠用药治疗前后空腹血糖(FBG)变化

4 实验性2型糖尿病IR大鼠用药前后血胰岛素含量的影响

5 实验性2型糖尿病IR大鼠用药前后胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)变化情况

6 盐酸小檗碱对实验性2型糖尿病大鼠血清炎症因子的影响情况

7 各组胰腺β细胞形态学改变

讨论

一、2型糖尿病与胰岛素抵抗

二、炎症因子致胰岛素抵抗机制

三、与2型糖尿病相关的炎症因子

四、本实验的结果分析和思考

结论

附录照片

参考文献

第二部分盐酸小檗碱对2型糖尿病患者血清炎症因子水平的影响

摘要

引言

对象与方法

结果

讨论

结论

参考文献

致谢

附录综述：黄连素对2型糖尿病作用机制及疗效的研究进展

个人简历 在读期间发表的学术论文与研究成果