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第一章 前言
第一节 研究目的和意义
第二节 绿藻概述
1.2.1 杜氏盐藻
1.2.2 杜氏盐藻的光和诱导型启动子
1.2.3 雨生红球藻
第三节 绿藻基因工程概述
1.3.1 八氢番茄红素合成酶
1.3.2 绿藻基因工程的应用现状
第四节 绿藻遗传转化的研究进展
1.4.1 阿特拉津
1.4.2 阿特拉津氯水解酶
1.4.3 电转化
1.4.4 农杆菌介导的遗传转化
1.4.5 绿藻遗传转化方法的研究进展
第二章 材料与方法
第一节 实验材料
2.1.1 藻种、菌株及质粒
2.1.2 试剂及培养基
2.1.3 引物
2.1.4 仪器
第二节 实验方法
2.2.1 盐藻的纯化
2.2.2 阿特拉津临界浓度的测定
2.2.3 载体cbr-psy-atzA-1301的构建
2.2.4 atzA-pGreen0029载体的构建
2.2.5 根癌农杆菌的转化及重组子筛选
2.2.6 绿藻细胞的培养计数
2.2.7 绿藻转化体系的建立
2.2.8 阳性转化子的筛选
第三章 结果与分析
第一节 绿藻细胞的纯化及阿特拉津临界浓度的测定
3.1.1 盐藻细胞的纯化
3.1.2 阿特拉津临界浓度的测定
第二节 八氢番茄红素过表达植物载体的构建
3.2.1 阿特拉津氯水解酶基因的克隆
3.2.2 外源psy基因及盐藻本身psy基因的克隆
3.2.3 盐藻光合诱导型启动子cbr的克隆
3.2.4 质粒载体的改造
3.2.5 cbr-psy-arzA-1301载体的构建
第三节 微藻的遗传转化
3.3.1 1×HEPES高盐杜氏盐藻细胞的电转化
3.3.2 1×HEPES高盐雨生红球藻细胞的电转化
3.3.3 农杆菌转化1.6×Y6低盐杜氏盐藻细胞
第四节 转基因绿藻阳性植株的筛选检测
第四章 讨论
第一节 绿藻的纯化和生长条件的改善
第二节 转基因绿藻筛选标记的研究
第三节 绿藻遗传转化方法的研究
第四节 绿藻基因工程的前景与展望
小结
参考文献
致谢
个人简历、在学期间发表的学术论文