梗阻性黄疸及胆汁引流方法对大鼠肠道sIgA的影响

摘要

背景：梗阻性黄疸患者易发生内毒素血症、术后感染等并发症，提示梗黄可损伤机体免疫防御功能。既往研究提示梗阻性黄疸可损伤肠黏膜机械屏障，肠黏膜通透性增加，内毒素吸收入血导致败血症的发生。梗黄对肠黏膜免疫屏障的影响成为近来的研究热点，分泌型免疫球蛋白(sIgA)是维持肠道黏膜免疫的主要免疫球蛋白，是肠道黏膜免疫的第一道防线，梗阻性黄疸能降低肠道内sIgA含量，损伤肠黏膜免疫屏障。但关于胆汁内外引流能否改善梗黄大鼠肠道内的低sIgA状态及胆汁内引流术与外引流术的优劣性，目前尚无相关报道。肠道内sIgA来源于肠道自身分泌和胆汁，肠道自身来源的sIgA形成需经过两个步骤：一、肠黏膜固有层IgA+浆细胞合成IgA mRNA经蛋白翻译过程分泌IgA，通过J链连接形成二聚体IgA；二、二聚体IgA经过肠黏膜上皮细胞表达的多聚免疫球蛋白受体(pIgR)转运至肠腔，经蛋白酶水解，pIgR的胞外片段(SC)脱落与二聚体IgA形成具有稳定结构和功能的sIgA。目前关于梗阻性黄疸及胆汁引流影响肠道内sIgA的机制尚无相关报道。
　　 目的：探讨梗阻性黄疸及胆汁内外引流术对肠道内sIgA的影响，进一步比较胆汁内引流术与外引流术在恢复肠道内sIgA含量，增强黏膜免疫功能方面的优劣性，探讨梗黄影响肠道内sIgA含量的初步机制。
　　 材料与方法：采用成年雄性SD大鼠60只，随机分为四组，分别建立梗阻性黄疸(OJ=15)、胆汁外引流(ED=15)、胆汁内引流(ID=15)、假手术(SH=15)模型。实验第一天进行胆管结扎切断术和假手术分别建立OJ和SH模型，实验第八天留取OJ和SH标本，对OJ大鼠分别进行胆汁外引流术和胆汁内引流术，第十五天留取ED和ID标本。取近段空肠5cm肠段内容物，离心取上清液通过双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠肠道内sIgA含量。通过RT-PCR方法测定近段空肠黏膜内IgA mRNA和pIgR mRNA相对表达量的变化分别反映IgA的肠道合成过程和肠道自身转运过程，预测sIgA的肠道来源的变化。
　　 结果：梗阻性黄疸形成后，大鼠肠道内sIgA含量较假手术组明显降低(OJ=14.97±1.62μg/ml，P=0.001 vs SH=17.71±1.95μg/ml)，胆汁外引流术不能恢复肠道内sIgA含量(ED=15.88±1.77μg/ml，P=0.187 vs OJ)，而胆汁内引流术能逆转肠道内的低sIgA状态(ID=17.32±1.75μg/ml，P=0.596 vs SH)，胆汁内引流在恢复肠道内sIgA方面优于外引流(P=0.048，ID vs ED)。OJ组大鼠的肠黏膜IgAmRNA(OJ=0.666±0.184，P=0.047，vs SH=0.478±0.186)和pIgRmRNA(OJ=0.642±0.188，P=0.014，vs SH=0.415±0.161)表达增强；接受胆汁外引流的ED组大鼠IgA mRNA(ED=0.652±0.134，P=0.863，vs OJ)和pIgRmRNA(ED=0.599±0.152，P=0.598，vs OJ)与OJ组相比无明显变化；而内引流组大鼠的IgAmRNA(ID=0.459±0.162，P=0.014，vs ED；P=0.824，vs SH)和pIgR mRNA(ID=0.439±0.133，P=0.03，vs ED；P=0.731，vs SH)表达量明显下降，几乎恢复至SH水平。
　　 结论：梗阻性黄疸可明显降低大鼠肠道内sIgA含量，影响肠道黏膜免疫屏障功能，胆汁内引流可有效改善肠道的低sIgA状态，而外引流作用不明显，胆汁内引流术在恢复肠道内sIgA含量，维持黏膜免疫功能方面优于胆汁外引流术；梗阻性黄疸影响肠道内sIgA含量并非通过影响肠道合成IgA及pIgR蛋白数量的变化，从而影响肠黏膜对IgA的合成及转运过程起作用，肠道来源并非肠道sIgA变化的主要原因，梗阻性黄疸可能是通过影响sIgA的胆汁来源途径而影响肠道内sIgA含量。

目录

文摘

英文文摘

符号说明

第一章 引言

第二章 材料和方法

第一节 梗阻性黄疸及胆汁引流方法对大鼠肠道内sIgA的影响

2.1.1 实验材料

2.1.2 实验方法

2.1.3 数据处理

第二节 梗阻性黄疸及胆汁引流方法对大鼠肠道内sIgA的影响机制

2.2.1 实验材料

2.2.2 实验方法

2.2.2 数据处理

第三章 结果和分析

第一节 梗阻性黄疸及胆汁引流方法对大鼠肠道内sIgA的影响

3.1.1 各组模型大鼠基本情况

3.1.2 各组模型大鼠体重变化

3.1.3 各组大鼠死亡情况

3.1.4 各组大鼠近端空肠sIgA的变化

第二节 梗阻性黄疸及胆汁引流方法对大鼠肠道内sIgA的影响机制

3.2.1 各组大鼠肠黏膜IgA mRNA含量变化.

3.2.2 各组大鼠肠黏膜pIgR mRNA表达量变化

第四章 讨论

第一节 梗阻性黄疸及胆汁引流方法对大鼠肠道内sIgA的影响

4.1.1 研究背景

4.1.2 各组大鼠基本情况及死亡率比较

4.1.3 梗黄及胆汁引流对肠道内sIgA的影响

第二节 梗阻性黄疸及胆汁引流方法对大鼠肠道内sIgA的影响机制

4.2.1 研究背景

4.2.2 梗黄及胆汁内外引流对IgA mRNA的影响

4.2.3 梗黄及胆汁内外引流对pIgR mRNA的影响

4.2.4 小结

第五章 结论

参考文献

文献综述：梗阻性黄疸对肠黏膜屏障的影响

参考文献

致谢

个人简历