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输血对受者血液循环中STRs基因型影响的研究

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目录

第一部分临床输血对受者血液循环中STRs基因型影响的研究

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第二部分输血对受者血液循环中STRs基因型影响的动物实验研究

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

输血后受者血液循环中供者血细胞的检出方法

附录

致谢

声明

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摘要

1.目的:探讨不同输血量、输血后不同时间供者STRs基因型对受者STRs基因型检测结果是否有影响。方法:3例患者分别接受输血400ml、800ml及1200ml,输血前以及输血后分别在4h、8h、12h采集受者血液,受者和供者血样用EDTA抗凝,采用Chelex-100法提取DNA,一4℃保存备用。选择D1S549,D18S865,D3S1754,D12S391,D12S375,D6S477等6个基因座进行PCR扩增,电泳分型。结果:3例患者分别输血400ml、800ml及1200ml后,输血前及输血后12h内采集血样检测的6个基因座STRs基因型完全一致。结论:本次研究结果表明,输血量在1200ml以下的受者输血后12h内STRs基因型检测结果未受供者血液STRs基因型的干扰。 2.目的通过临床输血进行受者血液循环中STRs基因型的研究较为困难,本研究采用动物模型的方法探讨不同输血量、输血后不同时间供者STRs基因型对受者STRs基因型检测结果是否有影响。方法:选择4只无血缘关系的健康家养杂种狗,分别抽120ml血,根据交叉配血结果和基因座判型结果,按照120ml、100ml、80ml、50ml的量分别输血给另一只狗,收集4只狗输血前以及输血后0min、30min、1h、2h、4h、8h、12h、24h、36h、48h的血液1ml,EDTA抗凝,用Chelex-100法提取DNA,一4℃保存备用。选用狗的STR基因座FH2004和FH2054进行PCR扩增,扩增产物用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳,银染显色分型。结果:FH2004基因座电泳分型结果不能满足试验要求被舍弃,FH2054基因座基因型因其在供者与受者之间差异最大,电泳谱带相互不干扰而被作为检测的指标。FH2054基因座的检测结果显示受者输血量在120ml以下,输血前及输血后48h以内STRs基因型完全一致。结论:输不同血量的受者输血后48h内STRs基因型未受供者血液STRs基因型的影响。

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