软骨素酶ABC促大鼠损伤脊髓功能恢复的实验研究

摘要

目的：在大鼠脊髓损伤模型中灌注软骨素酶ABC，利用其对硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)的降解作用，调控一种生长相关蛋白在损伤处高水平表达，促进脊髓轴突的再生，进而促进损伤后脊髓运动和本体感觉功能的恢复．从而证明CSPGs在体内是重要的抑制因子，对其活性进行抑制调控将有助于治疗人类脊髓损伤． 方法：1、采用健康成年SD雌性大鼠T7.8脊髓横断蛛网膜下腔置管灌注动物模型。实验组(n=20)10天内隔天灌注高纯度无蛋白酶ChABC6微升(10U/微升)，对照组(n=20)10天内隔天灌注生理盐水6微升。2、造模术后2W脊髓标本行OBT1696免疫组化染色观察CSPGs降解，术后1W、2W、3W、4W、5W、6W、8W、10W进行行为学评估，术后10W脊髓标本行NF-200、GFAP、NSE、PKC-γ免疫组化染色，并采用免疫组化图像分析系统进行定量分析。 结果： 1、行为学评分：正常组行为学评分为53.5分，损伤后3QW实验组和对照组评分无差异，4W后实验组评分高于对照组(P<0.05)。2、免疫组化结果：OBT1696，实验组损伤区呈弱或中等阳性表达，对照组为强阳性；NF-200，实验组损伤区及远近端阳性表达，对照组损伤区及远端弱阳性或阴性表达；GFAP，对照组强阳性，明显高于实验组；NSE，实验组呈中等阳性，对照组为弱阳性；PKC-γ，对照组PKC-γ阳性反应物主要沉积于细胞膜，出现“移位激活”，实验组沉积不均匀，“移位激活”减少。 结论：1、CSPGs是细胞外基质中的主要抑制因子，其通过多种可能的机理抑制受损后脊髓轴突的再生。2、CHABC能有效降低大鼠脊髓受损部位的CSPGs的活性，从而促进脊髓轴突的再生和大鼠感觉、运动机能的恢复。

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参考文献

文献综述硫酸软骨素蛋白多糖在脊髓损伤修复中的作用

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