Gy1-Gy7嵌合基因表达载体转化烟草的研究及大豆胚尖法再生体系的改良

摘要

大豆起源于中国，是重要的农作物和经济作物。其品质育种是大豆育种的重要目标。虽然依靠常规育种技术已选育出大量的优质大豆品种，但是随着经济的发展和人们生活质量的提高，对大豆的品质提出了更高的要求，通过基因工程育种改良大豆遗传性状，使其具有更高的营养价值和经济价值，已成为当今大豆遗传育种研究的热点。本文首先对目前利用常规育种和基因工程育种对大豆品质改良的研究进展进行了综述。 大豆含有丰富的蛋白质，是世界上重要的植物蛋白来源。其中大豆球蛋白方面的研究受到人们的重视。11S大豆球蛋白是大豆贮藏蛋白的重要成分，目前已发现六种有功能的大豆球蛋白，G1、G2、G3、G4、G5和G7，编码这些大豆球蛋白的基因家族分别是Gy1、Gy2、Gy3、Gy4、Gy5和Gy7。在六种有功能的大豆球蛋白中，通过分析比较重要氨基酸含量发现，Gy7基因编码合成的G7大豆球蛋白含有最高的赖氨酸含量和含硫氨基酸含量，是目前已发现的优质大豆球蛋白基因。 本文将实验室已构建的两种表达载体pCAMBIA1301-Gy1-Gy7-NOS和pCAMBIA1301-Gy1-Gy7cDNA—NOS采用叶盘法分别转化烟草革新1号。经抗性筛选、分化和生根各获得转基因植株30和33棵，对T0代转基因植株进行PCR及PCR Southern检测结果显示，单转Gy7基因的转基因后代中有12棵呈现阳性，单转Gy7cDNA基因的后代中有13棵呈现阳性。试验结果表明，Gy7和Gy7cDNA基因已成功转入烟草中，并能够正常表达。本实验为以后利用两种表达载体转化大豆进而改良大豆蛋白质品质奠定了基础。 再生体系的建立是利用基因工程技术成功改良大豆品质研究的重要前期工作基础。本文采用胚尖法再生体系，以高蛋白大豆品种黑农35和黑生101为材料，研究不同浓度6-BA和IBA对胚尖出芽和伸长再生的影响，对大豆胚尖法再生体系进行了改良，为以后利用大豆胚尖法进行遗传转化提供理论依据。

目录

文摘

英文文摘

声明

致谢

第一部分：文献综述大豆品质改良的研究进展

摘 要

前 言

1.大豆品质改良的常规育种

1.1大豆外观品质的改良

1.2提高大豆蛋白质和脂肪含量

2.大豆品质改良的基因工程育种

2.1大豆油脂改良

2.2大豆蛋白质改良

3.问题与展望

第二部分：研究论文

第一篇Gyl-Gy7嵌合基因表达载体转化烟草的研究

摘 要

前 言

材料与方法

结果与分析

讨论

第二篇大豆胚尖法再生体系的改良研究

摘 要

英文摘 要

前 言

材料和方法

结果与分析

讨论

总结

附图：

参考文献

附录：中英文对照