中国人群Ⅰ型神经纤维瘤病基因分子特征及临床表型相关性研究

摘要

目的:在109例疑似Ⅰ型神经纤维瘤病(NF1)的中国病人中揭示NF1基因突变谱及基因型表型相关性，并且在中国大陆建立一种综合的有效检测NF1突变的策略。
　　方法:我们用Sanger测序，多重连接探针扩增法(MLPA)，结合cDNA测序筛查了100个家庭中109例疑似NF1的病人（咖啡斑，神经纤维瘤等）。
　　结果:我们发现了97例有致病突变的患者，其中34个为新突变。
　　结论:我们综合检测方法的总突变检出率为89％(89/100)，在符合美国国立卫生研究院(NIH)诊断标准组为93％(70/75)，构建了一个较大的中国人群NF1基因的突变谱。基于这些结果，将促使建立中国Ⅰ型神经纤维病早期诊断和遗传咨询的最优策略。此外，我们的研究发现1）那些临床上只表现为多发咖啡斑的人有很大概率是NF1(76％)和一定概率(24％)是由于其他类似NF1的疾病;2）15号外显子是一个潜在的突变热点;3）Lisch结节对于NF1是一个非常可靠的诊断标准，尤其是对于6岁以上的患者;4）贫血痣是一个潜在的新诊断标准。

目录

声明

摘要

英文缩略语表

前言

第一部分：疑似NF1患者的临床资料

1．1 NIH对NF1的诊断标准

1．2 对象

1．3 方法(辅助检查)

1．4．结果

1．5．对一些特别临床特征的讨论

第二部分：基于Sanger测序和cDNA测序发现的致病性突变和多态性

2．1 材料

2．1．1 对象

2．1．2 主要试剂和耗材

2．1．3 主要仪器

2．2 方法

2．2．1 基因组DNA提取

2．2．2 PCR引物设计

2．2．3 NF1基因片段扩增

2．2．4 PCR产物质量评估

2．2．5 PCR产物纯化

2．2．6 测序和数据分析

2．2．7 RT-PCR试验

2．3 结果

2．4 讨论

第三部分：MLPA发现的大片段缺失

3．1 材料和方法

3．2 结果

3．3 讨论

第四部分：关于突变检测的讨论

4．1 突变检测

第五部分：关于基因型表型相关性的讨论

5．1 统计分析

5．2 基因型表型相关性

结论

参考文献

致谢

攻读博士期间发表论文

English abbreviations

八年制学位论文要求