La neurofibromatosi di tipo I: uno studio di correlazione genotipo-fenotipo condotto su pazienti del sud Italia affetti da NF1

摘要

L identificazione di mutazioni nel gene della neurofibromatosi di tipo (NF1) ha rappresentatoudun considerevole impegno a causa della: lunghezza del gene, mancanza di cluster mutazionaliudsignificativi, diversità di lesioni patologiche fondamentali e presenza di pseudogeni NF1.udRecentemente la DHPLC (Denaturing High Performance Liquid Chromatography) è stataudapplicata con successo allo screening mutazionale di NF1 producendo una frequenza diudmutazioni rilevate tra 68% e il 72.5%. Inoltre, testando la stessa convenienza in unauddiagnostica di routine, noi abbiamo valutato prospettivamente, per mezzo della DHPLC e deludsequenziamento del DNA tutti i 60 esoni del gene NF1, compresi i siti di giunzione diudsplicing in un pannello di 85 pazienti NF1 consecutivi, geneticamente non caratterizzati ( diudcui 43 casi familiari e 42 casi sporadici) e provenienti dal sud-Italia (Sicilia e Calabria)udMutazioni della linea germinale sono state identificate in 64 soggetti: 20 di queste eranoudnuove e comprendevano: due codoni di stop: c.3574G>T (E1192X) e c.4078C>T (Q1360X);udcinque sostituzioni nucleotidiche: c.3327A>C (L1109F), c.3577T>A (F1193I), c.4180A>Gud(N1394D), c.4193T>A (V1398D), c.6364G>C (E2122Q); cinque piccole inserzioni:udc.310_1insTAGCATAAACGATGCTGGTCCAGCA, c.1074_5insGAACCTGCTTTTT,udc.4511_2insA, c.6488_9insA, c.6792_3insC ; sei piccole delezioni: c.4508delG, c.4625delA,udc.5524delA, c.7017delT, c.7084_9delAACTCT, c.7365delT e due mutazioni nel sito diudsplicing c.4269+1G>A, c.7806+1G>A.udAbbiamo inoltre dimostrato 4 differenti mutazioni del gene NF1 in 4 pazienti con gliomiudcerebrali non-ottici dello stesso tipo e grado istologico. Nessuna delle nuove mutazioni è stataudtrovata in cento cromosomi di controllo di un gruppo di individui sani provenienti dallaSiciliaude dalla Calabria.udQueste nuove mutazioni contribuiscono alla definizione dello spettro mutazionale della lineaudgerminale di NF1. La DHPLC conferma essere un rapido, efficente ed accurato mezzo perudl analisi mutazionale di NF1.