髋关节发育不良患者髋关节滑膜内P物质对关节炎症进展和软骨损伤机制的研究

摘要

研究背景:髋关节发育不良患者(Developmental dysplasia of the hip，DDH)的关节软骨退变进程关系着治疗方式的选择和预后效果。作为与炎症和疼痛有重要联系的神经肽P物质在DDH髋关节滑膜中的含量变化及可能存在的对髋关节软骨退变的影响尚未被研究。
　　目的:探讨不同退变进程的髋关节发育不良患者（Moderate DDH和Severe DDH）和股骨颈骨折患者体内血清、髋关节液和滑膜中P物质含量的变化。研究血清和滑液中P物质含量与关节疼痛和功能活动度的相关性;滑液中的P物质与炎性因子的相关性;P物质是否可引起滑膜细胞NF-κB通路的激活;以及P物质是否可通过滑膜细胞产生趋化因子诱导巨噬细胞侵袭浸润，从而影响软骨退变进程。
　　方法:收集Moderate DDH和Severe DDH患者的血、髋关节滑液和滑膜标本，比较P物质含量的变化;分析血清中P物质含量与视觉疼痛评分VAS和髋关节功能评分HHS的相关性;Elisa检测各组患者关节滑液中P物质含量与炎性因子的相关性;免疫组化检测滑膜中P物质、巨噬细胞，巨噬细胞趋化因子(MCP-1，MIP-1β)，NF-κB/P65蛋白含量的变化;体外分离培养DDH患者成纤维样滑膜细胞(DDHsynovial fibroblast，DDHSF)用P物质刺激DDHSF之后观察:NF-κB通路和MAPK通路的变化及上述通路在DDHSF分泌趋化因子过程中的作用。制作DDH大鼠模型，观察腹腔注射P物质受体阻滞剂(L703606)或NF-κB通路阻滞剂(PDTC)，对大鼠髋关节发育、关节滑膜炎症和关节软骨退变的影响。
　　结果:与对照组人群相比，Moderate DDH和Severe DDH患者的血清、滑液和滑膜中均可检测到P物质含量的增加，且随着关节炎症的进展，Severe DDH患者血清、滑液和滑膜中P物质的水平要全面高于Moderate DDH患者;Severe DDH患者血清P物质含量与VAS和HHS呈显性相关;Severe DDH患者髋关节滑液中SP含量与IL-1β、TNF-α和IL-10呈正相关;P物质刺激体外分离培养的滑膜细胞可引起滑膜细胞的NF-κB通路和MAPK通路激活并引起相应关键蛋白的磷酸化水平的改变;NF-κB通路或MAPK通路的激活可能参与了P物质引起的滑膜细胞分泌趋化因子的过程;腹腔注射L703606和PDTC的DDH模型大鼠较腹腔注射溶媒(DMSO)的DDH大鼠:髋关节发育程度明显好转;髋关节滑膜的增生程度及炎性细胞的浸润明显减少;后肢耐热、耐机械疼痛刺激阈值明显提高;髋关节软骨退变程度明显好转。
　　结论:随着DDH关节炎症进展，髋关节滑液和滑膜中P物质含量逐渐增加，并通过作用于滑膜细胞表面NK-1R受体，激活胞内的NF-κB通路和MAPK通路，促使滑膜细胞分泌炎性因子（IL-1β、TNF-α）和巨噬细胞趋化因子（MCP-1和MIP-1β）引起巨噬细胞在滑膜中募集。P物质受体阻滞剂和NF-κB通路阻滞剂可以有效缓解DDH大鼠髋关节滑膜中炎性浸润和关软骨退变进程。

目录

声明

摘要

符号和单位说明

绪论

参考文献

第一部分 髋关节发育不良患者血清、关节液、滑膜中P物质含量测定及其与髋关节疼痛、退变的关系

1．研究背景

2 实验材料与方法

3．统计方法

4．结果与分析

5．讨论

参考文献

第二部分 髋关节滑膜和滑液中P物质含量与髋关节发育不良患者的关节炎症进展的关系研究

1．实验背景

2．实验内容与方法

3．统计方法

4．结果

5．讨论

参考文献

第三部分 研究襁褓体位对大鼠髋关节软骨中二型胶原、蛋白聚糖及金属基质蛋白酶-13表达的影响

1．研究背景

2．材料与方法

3．统计学方法

4．结果

5 讨论

参考文献

第四部分 髋关节发育不良患者滑膜中P物质通过NK-1R受体激活DDH髋关节滑膜细胞的NF-κB／MPK信号通路引起MCP-1和MIP-1β的释放

1．研究背景

2．实验材料与方法

3．统计方法

4．结果

5．讨论

参考文献

第五部分 蛋白酶体抑制剂MG132对DDH大鼠髋关节发育及软骨退变进程的影响

1．研究背景

2．实验材料与方法

3．统计方法

4．结果

5．讨论

参考文献

全文总结

致谢

攻读博士学位期间的学术论文与科研成果