低强度超声结合血卟啉杀伤和诱导艾氏腹水瘤细胞凋亡的研究

摘要

据WHO预测，恶性肿瘤将成为21世纪危害人类健康的头号杀手，但就目前肿瘤的治疗而言，特别是中晚期肿瘤，任何一种常规治疗均不能单独成为一种根治肿瘤的手段，综合治疗已逐渐成为治疗肿瘤的主要方法。本文在综合国内外研究进展的基础上，通过显微和超微结构等层次对超声结合血卟啉杀伤腹水型艾氏腹水瘤细胞(EAT)的动态变化过程进行了观察分析，同时利用AV-PI荧光双染、TUNEL法及免疫细胞组织化学等方法对超声结合血卟啉诱导EAT细胞凋亡以及与凋亡相关蛋白的变化进行了研究。通过加入自由基清除剂对超声结合血卟啉作用效应的影响和检测细胞中MDA的含量，探讨了SDT的作用机理。

目录

文摘

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前言

1超声激活血卟啉抗肿瘤效应的研究状况

1.1声动力学疗法的提出

1.2光敏剂及其特性

1.2.1血卟啉及其衍生物的生化特征

1.2.2其它药物作为声敏剂

1.3超声及超声作用的物理机制

1.4声动力学疗法的研究状况

1.5肿瘤细胞声敏位点损伤的研究进展

1.5.1线粒体和内质网

1.5.2细胞膜

1.5.3细胞核及DNA

1.5.4骨架及微管微丝

1.6声动力学疗法的机制

1.6.1超声空化效应

1.6.2单线态氧机制

1.6.3自由基理论

1.6.4诱导细胞凋亡

2声动力学疗法与细胞凋亡

2.1细胞凋亡与肿瘤的发生和发展

2.2细胞凋亡与肿瘤的治疗

2.3细胞凋亡的调节

2.3.1 caspase家族(半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶)

2.3.2 bcl-2家族

2.3.3 p53

2.4声动力学疗法诱导肿瘤细胞凋亡

2.5细胞凋亡与氧化应激

2.5.1活性氧对细胞损伤的途径

2.5.2氧自由基诱导细胞凋亡

3本论文的立论依据及目的意义

4超声结合血卟啉对艾氏腹水瘤细胞(EAT)杀伤效应的研究

4.1超声强度及血卟啉浓度参数的筛选

4.2超声结合血卟啉对EAT细胞杀伤效应的形态学研究

4.2.1普通光学显微镜观察超声处理后细胞结构的变化

4.2.2扫描电镜观察处理后细胞表面超微结构的变化

4.2.3透射电镜观察处理后细胞超微结构的变化

4.3超声结合血卟啉诱导EAT细胞凋亡的研究

4.3.1 Annexin V-FITC/PI荧光双染

4.3.2 TUNEL法检测细胞凋亡

4.3.3讨论

4.3.4超声激活血卟啉对EAT细胞中Caspase-3、Bcl-2、Bax和p53蛋白表达的免疫组化研究

4.4超声结合血卟啉杀伤EAT细胞机制的研究

4.4.1自由基清除剂对超声结合血卟啉杀伤EAT细胞的作用

4.4.2超声结合血卟啉对EAT细胞脂质过氧化的影响

总结

致谢

参考文献

图版及图版说明

攻读学位期间的研究成果