FE65L2全长基因及其多种剪接体的克隆鉴定及功能的初步研究

摘要

首先,研究人员采用SMART试剂盒构建了高质量的人胎脑iDNA文库,从文库中克隆得到了一条编码491个氨基酸的全长iDNA.通过序列比较发现该iDNA是人的FE65L2基因的一个新的剪接异构体.接下来,研究人员在原核系统中表达了该基因,并通过蛋白质N端氨基酸测序验证了该基因的表达.用这个重组表达的蛋白为抗原免疫家兔得到了抗FE65L2的多克隆抗体.研究人员在接下去的工作中就可以利用抗体做免疫荧光和免疫组化来将F365L2在组织中和细胞内定位.另一方面,通过RT-PCR又找到了FE65L2基因的其余三种剪接异构体.生物信息学分析显示FE65L2的四种剪接体是由在一个内含子中的两个长度分别为6nt和21nt的小外显按不同的方式拼接而成.不同组织的RT-PCR的结果表明四种FE65L2的剪接体不同组织中的表达存在差异.

目录

英文缩写词表

前言

实验第一部分

1材料和试剂

2实验方法

3实验结果

4讨论

实验第二部分

1材料和试剂

2实验方法

3结果

4讨论

参考文献

致谢

附录一览