出生后大鼠牙胚组织中nfic基因多种选择性剪接体的克隆研究

摘要

目的:研究nfic基因在牙齿发育中的作用.方法:提取出生后 SD 大鼠磨牙牙胚组织总mRNA, 反转录合成cDNA.根据NCBI GeneBank中nfic cDNA序列,分别设计2 对PCR引物,进行nfic基因部分序列的扩增,扩增产物与T载体进行T/A连接,然后转化高效感受态大肠杆菌DH5α,挑取阳性克隆进行酶切鉴定,并对扩增产物进行序列测定.结果:P1、P2为引物进行PCR扩增,可见大小约350 bp的特异扩增产物;以P3、P4为引物进行PCR扩增,电泳可见大小不同的3条特异扩增产物,经克隆后的序列测定,为大鼠nfic基因的3 种可变剪接体.结论:nfic基因在大鼠牙齿发育后期、牙根的发育前期有表达,并且存在至少3 种大鼠nfic基因选择性剪接体.