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葡萄球菌肠毒素B的分子修饰及其生物学活性研究

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前 言

第一部分SEB分子修饰的基本思想及其构象分析

1 SEB与TCR Vβ、MHCⅡ作用的分子机制

2 SEB分子修饰的基本思想

3野生型SEB和分子修饰后SEB的构象分析

第二部分SEB野生型和突变体原核表达重组体的构建及鉴定

1材料与方法

2结果

3讨论

第三部分SEB-N,SEB-M23和SEB-M150蛋白的表达和纯化

1材料与方法

2结果

3讨论

第四部分分子修饰后的SEB生物学活性的研究

1材料与方法

2结果

3讨论

第五部分分子修饰的SEB免疫保护作用及抗瘤效应的初步应用

1材料和方法

2结果

3讨论

小 结

参考文献

致谢

文献综述

附录

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摘要

超抗原与许多疾病的发病密切相关及其在抗肿瘤中的潜在作用使其成为一类倍受重视的新型分子,葡萄球菌肠毒素B是目前研究最为深入的超抗原.该课题通过SEB与TCR Vβ、MHCⅡ相互作用的分子机制,利用分子模拟技术,寻找降低SEB超抗原活性的分子修饰靶点.应用寡核苷酸指导下的定点突变技术、基因重组和克隆技术,构建了含点突变超抗原SEB(SEB-M23和SEB-M150)原核表达重组体,同时构建了含野生型超抗原SEB(SEB-N)原核表达重组体作对照.通过亲和层析,从表达重组菌裂解液中纯化了以上三种SEB蛋白.

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