内毒素耐受小鼠IFN-γ、IL-10的表达以及骨髓树突状细胞功能的初步研究

摘要

感染性疾病是危胁人类健康的主要疾病之一，革兰阴性杆菌是临床常见的致病菌。内毒素(endotoxin)/脂多糖(LPS)是革兰阴性杆菌细胞壁的重要结构成分和致病因子，革兰阴性杆菌感染时，可出现内毒素血症，严重时可并发急性呼吸窘迫综合症(ARDS)、多器官功能衰竭(MOF)，死亡率很高。目前无针对内毒素的特效治疗。内毒素耐受指接受小剂量内毒素刺激后形成的对大剂量内毒素呈低反应或无反应的现象，其特征是单核/巨噬细胞产促炎症细胞因子能力下降。 本实验采用连续小剂量腹腔注射内毒素的方法建立内毒素耐受小鼠模型，用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测注射大剂量内毒素前和注射后6小时血清和肺组织中的IL-10的水平以评价内毒素耐受时抑炎症细胞因子的产生情况；从小鼠骨髓分离、培养DCs，检测内毒素耐受小鼠骨髓DCs对病原体成分葡聚糖的吞噬功能；检测内毒素耐受小鼠骨髓DCs表面协同刺激分子的表达，间接评价DCs的抗原呈递功能；采用ELISA检测内毒素耐受小鼠骨髓DCs培养液上清中IL-12的水平，和正常小鼠骨髓DCs对比分析，从而进一步明确内毒素耐受现象的本质，为其应用于临床防治感染性疾病提供实验室依据。 结论：(1)小剂量(1mg/kg/d)LPS连续腹腔注射4天能够在C57BL/10J正常小鼠中建立内毒素耐受小鼠模型。(2)内毒素耐受小鼠注射大剂量LPS后TNF-α、IFN-γ等促炎症细胞因子表达受抑制，而主要的抑炎症细胞因子IL-10的表达未受明显影响，IFN-γ/IL-10平衡存在向IL-10方向移动的趋势。(3)内毒素耐受小鼠骨髓DCs吞噬功能增强可能是内毒素耐受动物清除病原体能力较强的机制之一。(4)流式细胞检测显示ET时DCs表面协同刺激分子表达上升，初步提示DCs的抗原呈递能力增强。

目录

第一部分：内毒素耐受小鼠血清和肺组织IFN-γ、IL-10表达的动态变化

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

第二部分：内毒素耐受小鼠骨髓树突状细胞的吞噬功能和抗原呈递功能的初步研究

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

致谢

综述：树突状细胞的抗原递呈及临床应用前景

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