摘要
ABSTRACT
第一章 前言
1.1 研究意义
1.2 白内障研究进展
1.2.1 白内障形成机理
1.2.2 白内障相关基因的研究进展
1.2.3 白内障基因的突变方式
1.3 立题背景
1.3.1 白内障小鼠的来源
1.3.2 白内障治病基因的定位克隆策略
1.3.3 全基因组STR位标扫描实验原理
1.3.4 双脱氧链终止法测定DNA序列原理
1.4 研究思路
第二章 材料与方法
2.1 材料
2.1.1 实验群体
2.1.2 仪器和试剂
2.2 方法
2.2.1 遗传方式验证
2.2.2 动物模型的构建
2.2.3 白内障病理切片的制作
2.2.4 小鼠基因组DNA抽提
2.2.5 全基因组扫描所用F2代小鼠和marker的选择
2.2.6 全基因组扫描和精细定位所用STR的选取
2.2.7 全基因组扫描和精细定位STR的分型方案
2.2.8 STR片段的凝胶电泳检测
2.2.9 目标基因的cDNA测序
2.2.10 突变位点检测
2.2.11 RT-PCR半定量
2.2.12 生物信息学分析
2.3 统计学分析
2.3.1 突变小鼠的连锁分析
第三章 结果与分析
3.1 遗传方式验证结果
3.2 白内障形态学分析结果
3.2.1 前囊和前囊下浅层皮质
3.2.2 赤道部
3.2.3 核心部
3.2.4 后囊及后囊下皮质
3.3 基因组DNA抽提结果
3.4 全基因组扫描和精细定位的STR分型结果
3.5 单倍型分析结果
3.6 候选基因的cDNA测序结果
3.7 突变位点验证结果
3.8 RT-PCR半定量结果
3.8.1 RNA抽提结果
3.8.2 RT-PCR半定量结果
3.9 生物信息学分析结果
3.9.1 理化性质分析
3.9.2 疏水性分析
3.9.3 跨膜结构分析
3.9.4 蛋白质结构域与功能分析
3.9.5 蛋白质三维结构分析
第四章 讨论
4.1 突变基因的遗传方式与同源基因导入同类系
4.2 形态学、组织学分析
4.3 基因定位结果
4.4 突变位点验证
4.5 生物化学特性分析
4.6 Crygc基因对于晶状体发育的重要性
第五章 结论与展望
参考文献
课题来源
上海市科学技术委员会(09140901100)
攻读硕士学位期间发表学术论文目录
致谢