HPLC-CL联用技术在食品添加剂检测中的应用

摘要

本课题将高灵敏度的化学发光检测技术与高效能、高分辨力的高效液相色谱以适当的方式相结合，集两种技术之优点子一体，建立了以下常见食品添加剂的检测方法。
　　 本文详细考察了化学发光反应及色谱分离分析的最佳条件。通过单因素分析，讨论了化学发光试剂，氧化剂等的用量对化学发光反应效果的影响，优化了最佳化学发光反应条件;通过对流动相、流速、柱温及检测波长的研究，优化了最佳色谱分离分析条件。
　　 在最佳化学发光和色谱条件下，建立了香兰素、苏丹红Ⅰ、维生素C和过氧化苯甲酰的HPLC-CL测定法，考察了所建方法的线性范围、精密度、检出限和准确度，并将所建方法用于食品中相应分析，研究了所建方法的可行性。同时考察了所建方法用于实际样品测试的重现性。
　　 对于香兰素，在碱性条件下，香兰素能增强光泽精-过氧化氢-氢氧化钠体系的化学发光强度，基于此建立了高效液相色谱和化学发光联用测定香兰素的方法，并成功应用于食品中香兰素的测定。所建香兰素分析方法的线性范围为1.0～20.0μg·mL-1，回归方程为I=8.539+2.953×106C，相关系数R=0.9921，精密度为1.97％(c=8.0μg·mL-1，n=6)，检出限为3ng·mL-1，加标回收率为98.2～103.3％。
　　 对于苏丹红Ⅰ，在碱性条件下，苏丹红Ⅰ对鲁米诺—高碘酸钾体系有增敏作用。根据这一现象，建立了高效液相色谱和化学发光联用测定苏丹红Ⅰ的分析方法。在最优化学发光和色谱条件下检测。所建苏丹红Ⅰ分析方法的线性范围为0.001～0.50μg·mL-1，回归方程为I=8.393×103C+224.5，相关系数R=0.9996，精密度为1.45％(c=0.01μg·mL-1，n=6)，检出限为5ng·kg-1，加标回收率为95.0～104.0％。对于维生素C，由于维生素C与重铬酸钾的还原反应产生铬(Ⅲ)能强烈催化鲁米诺的化学发光，基于此建立了食品中维生素C的检测方法。在最优化的化学发光条件和色谱条件下，所建维生素C分析方法的线性范围为0.01～10.0μg·mL-1，回归方程为I=2.383×103C+393.6，相关系数R=0.9979，精密度为1.57％（c=6.0μg·mL-1，n=6），检出限为0.5ng·mL-1，加标回收率为94.6～102.0％对于过氧化苯甲酰，发现过氧化苯甲酰能增强高锰酸钾-鲁米诺化学发光体系的化学发光。根据这一现象，建立了高效液相色谱和化学发光联用测定过氧化苯甲酰的新方法。该线性范围为1.0～100.0μg·mL-1，回归方程为I=1.0427×104C+51.28，相关系数R=0.9971，精密度为2.1％（c=10.0μg·mL-1，n=6），检出限为0.2mg·g-1，加标回收率为97.5～99.2％。