肝细胞癌复发归巢机制的动物实验观察

摘要

该课题建立大鼠肝癌肝移植模型,观察HCC复发的特点,并通过供受体性别差异,判断移植肝内复发的HCC起源于受体还是供体.在此基础上尝试提出一种有别于多中心和肝内转移的新机制.而这种机制可能在肝切除术后复发中亦存在.第一部分:大鼠肝癌肝移植模型的建立及术后肝癌复发的特点.该部分目的是建立稳定的肝癌肝移植动物模型并观察术后肝癌复发的生物学特点.130只雄性SD大鼠,100ppm二乙基亚硝胺饲喂诱癌.健康雌性SD大鼠作供体,共98只大鼠据Kamada袖套技术行原位肝移植.术后不给免疫抑制剂.术中根据肿瘤大小分三组:1组有明确肝癌结节但直径<1.0cm(n=25),2组肝癌结节直径1.0-1.5cm(n=41),3组肝癌结节直径>1.5cm(n=32).不行肝移植术的10只大鼠作对照组.三组大鼠肝移植术中死亡率26.5﹪(26/98),术后30d累计死亡率71.5﹪(70/98).术后存活30d后计算平均生存期,1组81.3±33.2d,2组67.6±24.9d,3组54.4±24.9d.对照组从诱癌开始150d后计算,平均生存期为29.4±12.9d.术后肝癌复发率35.7﹪(10/28),单纯移植肝内复发7.1﹪(2/28),肝和肺同时复发10.7﹪(3/28),肝和腹腔同时复发3.6﹪(1/28),单纯腹腔肿瘤7.1﹪(2/28),单纯肺部肿瘤7.1﹪(2/28).1,2,3组肿瘤复发率分别为12.0﹪,12.2﹪,12.5﹪,之间无明显差异.肝内复发率60.0﹪(6/10),病理发现3个复发的移植肝内共散在13个肿瘤,未见腹腔内复发的肝癌直接侵犯移植肝.第二部分:移植肝内复发肝细胞癌起源的研究.该部分旨在探寻移植肝内肝细胞癌复发的细胞起源.6只受体大鼠移植肝内出现肝癌复发,3只因死亡时间过长标本弃用,另3个可用移植肝共13个肿瘤在大鼠存活时取下保存在-70.大鼠sry基因序列作模板,随机引物法通过PCR制备能特异性与大鼠Y染色体结合的地高辛标记的DNA探针,原位杂交的方法检测肝内复发肝癌细胞核中的Y染色体.雄性大鼠正常肝组织和肝癌组织作阳性对照,雌性大鼠肝组织和未标记的DNA探针作阴性对照.

目录

英文缩写词表

前言

第一部分大鼠肝癌肝移植模型的建立及术后肝癌复发的特点

材料与方法

结果

讨论

附图

第二部分移植肝内复发肝细胞癌起源的研究

材料与方法

结果

讨论

附图

总结

参考文献

附录一：致谢

附录二 综述一:肝细胞癌复发来源的认识

附录二 综述二：血细胞归巢与肿瘤细胞定向转移的分子基础

附录三 在读期间发表和投稿的文章

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