超声激活血卟啉抑肝细胞抗失巢凋亡能力的机制初初探

摘要

目的 探讨血卟啉经超声激活后能否生成单线态氧、降低骨桥蛋白(osteopontin，OPN)表达，从而抑制肝癌细胞株HepG2的抗失巢凋亡能力。方法 将HepG2细胞悬液随机分为5组：血卟啉组，培养液中加入血卟啉40 ul孵育30 s；超声辐照组，以1.0 MHz、1．5 W/cm2超声辐照30 s；血卟啉与超声辐照组，同样方法予以血卟啉与超声联合处理；血卟啉、组氨酸与超声辐照组，加入活性氧捕获剂-组氨酸后进行血卟啉与超声联合处理；及空白对照组。各组处理后细胞悬液一部分利用1，3一二苯基异苯并呋喃(1，3-diphenylisobenzofuran，DPBF)估计单线态氧生成量，一部分在软琼脂中培养2 w后观察其集落形成能力，还有一部分经悬浮培养后以Annexin V—FITC/PI双染法检测失巢凋亡率、RT-PCR检测骨桥蛋白的mRNA表达、Western blot检测OPN的蛋白表达。结果 血卟啉与超声辐照组DPBF的相对消耗量即单线态氧生成量明显高于其它各组，且该组HepG2细胞在软琼脂中无细胞集落形成，与其它组相比失巢凋亡率增高(18．46±4.08％)、OPN的表达降低。结论 血卟啉经超声激活后产生的单线态氧可降低OPN表达，从而发挥其抑制HepG2细胞抗失巢凋亡的作用。