加巴喷丁对慢性胰腺炎大鼠机械性痛敏的治疗作用及机制探讨

摘要

[目的]
　　 腹痛是慢性胰腺炎最常见的临床症状之一，80％-90％的患者在发病过程中都会产生腹痛，因此，缓解疼痛在慢性胰腺炎的治疗中占有相当重要的地位。慢性胰腺炎所引起的腹痛症状不一，故在该问题的治疗上常常不能让患者满意，甚至是无功而返。关于慢性胰腺炎疼痛产生的原因虽然有很多假说，但目前其机制仍没有完全阐明。近来，国外有关慢性胰腺炎疼痛的综述从疼痛临床特点，生化及组织学检查的结果，脊髓改变情况等多方面指出神经病理性疼痛可能在慢性胰腺炎疼痛发展过程中起着重要作用。这也就表明对于神经病理性疼痛治疗有效的药物，如加巴喷丁，应该对慢性胰腺炎疼痛的治疗也能产生一定治疗效果。加巴喷丁(gabapentin，GBP)是一种新型的抗癫痫药物，已经明确其在对慢性疼痛的治疗上有治疗作用，特别是在对神经病理性疼痛的治疗上，如糖尿病性神经病变、带状疱疹后神经痛等等。目前，大家普遍认为加巴喷丁通过与钙离子通道的α2δ-1亚单位结合而阻止痛敏产生和中枢敏化。有报道指出在急性胰腺炎大鼠模型，加巴喷丁能提高亚剂量吗啡的镇痛效应。而且，很多研究表明加巴喷丁在慢性胰腺炎的疼痛治疗上常常被用作一种辅助用药。但是，到目前为止，没有任何动物实验能证明加巴喷丁对慢性胰腺炎疼痛的治疗效果。在本研究中，我们将在慢性胰腺炎大鼠模型上观察加巴喷丁的镇痛作用，并对其可能的潜在作用机制进行初步探讨。
　　 [方法]
　　 行为学实验二丁基二氯化物(dibutyltin dichloride，DBTC)尾静脉注射建立慢性胰腺炎模型。在行为学测试过程中，所有大鼠制模前及制模后每周都以von Freyhairs刺激大鼠上腹部，观察慢性胰腺炎大鼠对机械性刺激的阳性反应率的变化过程。在最后一周(第4周)每天给予加巴喷丁100 mg/kg，连续给药6天。每次给药后1小时进行行为学测试，观察加巴喷丁的镇痛效果。
　　 病理学观察最后一次行为学测试后，大鼠胰腺组织被取出，放入10％的福尔马林溶液中过夜固定，石蜡包埋后切成厚度为4μm的薄片，然后进行HE染色，用于观察大鼠胰腺病理改变情况。另外，肝脏和肾脏组织也在同一时点取材，判断是否有炎症浸润。
　　 分子生物学实验以Real-time PCR和Western blot技术为方法，观察慢性胰腺炎大鼠脊髓钙离子通道α2δ-1亚单位的表达情况以及加巴喷丁对钙离子通道α2δ-1亚单位表达的影响。
　　 [结果]
　　 行为学实验(1)慢性胰腺炎大鼠模型的建立与假手术组相比，DBTC诱导的慢性胰腺炎大鼠从第1周到第4周阳性反应率都出现了明显的增高(P＜0.05)。(2)加巴喷丁干预实验加巴喷丁(100 mg/kg/d)重复给药到第3天时，能引起慢性胰腺炎大鼠腹部机械性痛觉过敏减轻，与生理盐水组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。
　　 病理检查结果在DBTC尾静脉注射后27天，大鼠胰腺出现节段性的腺体萎缩，明显的纤维化，慢性炎症细胞浸润，大量腺泡细胞丢失。假手术组的胰腺没有观察到明显的形态学改变。另外，肝脏和肾脏都没有明显的病理改变。
　　 分子生物学实验(1)DBTC尾静脉注射后27天取大鼠脊髓T8-11，慢性胰腺炎大鼠脊髓钙离子通道的α2δ-1亚单位mRNA和蛋白水平均高于假手术组，差异有统计学意义(P＜0.01)。(2)慢性胰腺炎大鼠分别于加巴喷丁干预治疗后第一天和第六天取材。在第6天钙离子通道的α2δ-1亚单位mRNA和蛋白水平均出现下调，与生理盐水组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。
　　 [结论]
　　 本课题研究发现加巴喷丁能减轻慢性胰腺炎大鼠腹部机械性痛觉过敏，产生镇痛效应，其机制可能和降低脊髓钙离子通道亚单位α2δ-1的表达水平有关。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略语表

声明

前 言

第一节大鼠慢性胰腺炎模型的建立和行为学测定

材料与方法

结果

结论

第二节 加巴喷丁对慢性胰腺炎大鼠机械性痛敏的镇痛作用

材料与方法

结果

结论

第三节加巴喷丁对慢性胰腺炎大鼠脊髓钙离子通道α2δ-1亚单位表达水平的影响

材料与方法

结果

结论

讨论

参考文献

全文总结

文献综述一 神经性疼痛机制在慢性胰腺炎中的作用

文献综述二 瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)在胰腺炎中的作用

发表论文

致谢