甲状腺相关性眼病患者吲哚胺2,3--双加氧酶的变化及MRI与B超的临床价值

摘要

目的:甲状腺相关性眼病(thyroid-associated ophthalmopathy，TAO)是一种发生在眼眶组织的自身免疫性疾病，其发病中T细胞激活并分泌多种细胞因子如肿瘤坏死因子(TNF-α)、干扰素γ等作用于成纤维细胞起关键作用。吲哚胺2，3-双加氧酶(indoleamine2，3-dioxygenase，IDO)可以通过色氨酸代谢维持外周免疫耐受稳定和调控自身免疫反应，在多种自身免疫性疾病的发病机制中起重要作用。表达于树突状细胞(dendritic cells，DCs)的IDO可以抑制T细胞增生、诱导Tregs生成。通过测定TAO患者外周静脉血DCs的数量及IDO表达量、Tregs数量，眶后脂肪组织IDO表达量及Tregs数量，观察IDO在TAO中表达量的变化、Tregs数量改变，分析TAO来源DCs的IDO表达变化对T细胞增殖激活的影响、CTLA4-Ig对IDO的作用，探讨IDO在TAO发生发展中的作用及可能机制。眼眶超声检查和磁共振(MRI)检查是目前TAO病情评估中最常用的影像学手段，均可以测量眼外肌厚度，临床研究对比MRI与B超对眼外肌增粗的敏感性及在TAO患者病情评估和临床疗效预判中的作用。 方法:取TAO患者组及对照组的眶后脂肪组织，运用Real-Time PCR、Westernblotting、免疫组织化学的方法检测组织中IDO mRNA及蛋白的表达变化。收集TAO患者组及对照组的外周静脉血，提取单核淋巴细胞，采用流式细胞术测定外周血中IDO表达量、DCs的数量及IDO表达量、Tregs的数量。混合淋巴细胞反应，用外周静脉血体外诱导分化成DCs，并用CTLA4-Ig刺激TAO来源的DCs，再用免疫磁珠分选方法获取CD4+T细胞，将DCs与CD4+T细胞共培养，用免疫荧光染料CFSE标记CD4+T细胞，流式细胞术测定T细胞的增殖，对比不同来源的DCs对CD4+T细胞增殖的影响。临床研究选取61例TAO患者、14例健康对照者，予以眼科B超和眼眶MRI平扫检查，眼科B超测量眼外肌的厚度，眼眶MRI测量眼外肌的厚度、眼外肌的SIR、泪腺的横径。对比眼科B超与MRI在TAO临床病情评估中的作用。 结果:1、相较于正常对照组，TAO患者眶后脂肪组织中IDO的表达量下降，外周血中DCs的数量减少，DCs的IDO表达量下降，Tregs的数量减少。2、体外诱导分化的DCs，TAO组来源DCs的IDO表达量低于正常对照组，CTLA4-Ig刺激可以上调DCs的IDO表达。3、混合淋巴细胞反应中，来源于TAO的DCs组比正常对照DCs组CD4+T细胞增殖明显，CTLA4-Ig刺激TAO-DCs组的CD4+T细胞增殖数量较未刺激组下降。4、MRI测量的TAO患者双眼下直肌、外直肌厚度较B超大，差异有统计学意义;但是对于双眼上直肌、内直肌无明显差别。5、MRI测量的眼外肌厚度、B超测量的眼外肌厚度、MRI测量的泪腺横径均与CAS评分显著相关;双眼上、下、内直肌SIR与CAS评分明显相关。评估TAO病情时，MRI均优于B超。6、评估临床预期疗效时，MRI眼外肌厚度、SIR、泪腺横径3个联合时的敏感度(100％)最大，阴性预测值(100％)最大;CAS评分的特异度(85.71％)最大，阳性预测值(94.59％)最大。 结论:1、TAO患者外周血DCs及眶后脂肪组织的IDO表达量下降，可能通过促进T细胞增殖、抑制Tregs生成参与疾病的发生发展。2、MRI对双眼下直肌增粗更敏感，评估TAO病情及预测临床预期疗效时MRI均优于B超，MRI联合CAS评分更有效的评估TAO活动性及预测疗效。

目录

声明

摘要

缩略词表

前言

参考文献

第一部分 吲哚胺2，3-双加氧酶在甲状腺相关性眼病患者外周血及眶后脂肪组织中的变化及作用

一、材料与方法

二、实验结果

三、讨论

参考文献

第二部分 MRI与B超在甲状腺相关性眼病中的临床价值比较

一、对象与方法

二、研究结果

三、讨论

参考文献

全文总结

综述 甲状腺相关性眼病的免疫学进展

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致谢