猕猴桃皮渣多酚提取与分离鉴定

摘要

为提高猕猴桃的综合利用价值，以秦美、海沃德猕猴桃加工果干、罐头时切削下来的皮渣为原料，使用超声辅助法、Box-Behnken响应面设计优化了两种皮渣多酚的提取工艺条件;通过静态吸附率、解吸率的差异对7种不同大孔吸附树脂的多酚纯化效果进行了比较，确定了多酚纯化条件;采用HPLC法对皮渣中多酚组成进行了分析鉴定，并应用多种体外抗氧化体系对皮渣多酚的抗氧化能力进行了评价，为猕猴桃皮渣多酚的利用奠定了基础。研究取得的主要结论如下:
　　(1)采用超声辅助乙醇法提取秦美和海沃德皮渣多酚，根据各个单因素试验的分析结果，采用响应面法进行分析，建立了两种皮渣多酚提取得率与各个影响因素之间的二次多项式回归模型。BBD试验设计得到的秦美皮渣多酚适宜提取工艺条件为:乙醇浓度53％(V/V)，超声温度为60℃,液料比35∶1（mL/g），超声时间为60min，实际多酚提取得率为23.98mg/g，预测值为24.30mg/g，实际值达到了预测值的98.68％;海沃德皮渣多酚BBD试验设计得到的适宜提取条件为:乙醇浓度65％(V/V)，超声温度为65℃，液料比35∶1(mL/g)，超声时间为60min，实际多酚提取得率为18.83mg/g，预测结果为19.51mg/g，实际结果达到了预测值的96.51％。
　　(2)七种树脂对猕猴桃皮渣多酚的纯化效果不同。秦美猕猴桃皮渣多酚以D101树脂纯化效果较好，适宜条件为:多酚浓度为6mg/mL，上柱体积380mL，上柱流速1mL/min，洗脱剂为70％(V/V)的乙醇溶液，洗脱剂用量为145mL，1mL/min的洗脱流速，纯化处理后秦美皮渣多酚的纯度达70.10％;海沃德猕猴桃皮渣多酚以HPD400树脂纯化效果较好，适宜条件为:多酚浓度为3mg/mL，上柱体积300mL，上柱流速1mL/min，洗脱剂为70％(V/V)的乙醇溶液，洗脱剂用量为120mL，1mL/min的洗脱流速，纯化后海沃德皮渣多酚纯度为71.79％。
　　(3)通过HPLC检出秦美和海沃德皮渣中的单体酚种类和含量存在差异。秦美皮渣多酚纯化物中检出了9种不同的单体酚，含量由高到低分别为表儿茶素、原儿茶酸、杨梅素、绿原酸、槲皮素、没食子酸、对香豆酸、阿魏酸和根皮苷。海沃德皮渣多酚中检出了8种不同的单体酚，含量从高到低分别是槲皮素、杨梅素、表儿茶素、原儿茶酸、绿原酸、对香豆酸、阿魏酸和根皮苷。秦美皮渣中含量较多的单体酚为表儿茶素、原儿茶酸，共占所有多酚总量的81.11％;海沃德皮渣中含量较高的酚类是槲皮素和杨梅素，占所有多酚总量的74.05％。除槲皮素和杨梅素以外，秦美皮渣中各单体酚含量均高于海沃德皮渣，且秦美皮渣酚类总含量高于海沃德皮渣。
　　(4)秦美、海沃德皮渣多酚纯化物、粗提物的体外抗氧化研究显示:秦美、海沃德皮渣多酚具有一定的清除自由基，还原Cu2+、Fe3+及总抗氧化活性，其中秦美皮渣多酚纯化物清除自由基(DPPH·、ABTS+·、·OH)能力最强，其清除DPPH·的IC50=5.82μg/mL，但稍弱于阳性对照VC;清除ABTS+·自由基的Trolox当量为249.40mmol/g;·OH清除率与多酚浓度呈现正相关关系，随多酚浓度升高，清除率随之增大，但低于阳性对照VC对·OH的清除率;秦美皮渣多酚纯化物还原Cu2+、Fe3+的能力及总抗氧化能力最强，然后依次是海沃德皮渣多酚纯化物＞秦美皮渣多酚粗提物＞海沃德皮渣多酚粗提物。

目录

声明

摘要

第一章 文献综述

1．1 猕猴桃与多酚概述

1．2 植物多酚提取方法

1．2．1 有机溶剂浸提法

1．2．2 超声辅助提取法

1．2．3 微波辅助提取法

1．3 植物多酚分离纯化

1．4 植物多酚鉴定

1．5 植物多酚体外抗氧化方法

1．6 选题目的与意义

1．7 研究方法与内容

第二章 猕猴桃皮渣多酚的超声辅助提取研究

2．1 材料与方法

2．1．3 试验试剂

2．1．4 试验方法

2．1．5 数据处理

2．2 结果与分析

2．2．1 没食子酸标准曲线

2．2．2 超声辅助提取皮渣多酚单因素试验

2．2．3 响应面试验优化超声辅助提取皮渣多酚条件

2．3 小结

第三章 猕猴桃皮渣多酚大孔树脂纯化研究

3．1．2 试验试剂

3．1．3 试验方法

3．1．4 数据处理

3．2 结果与分析

3．2．1 静态吸附／解吸试验

3．2．2 动态吸附／懈吸试验

3．2．3 高效液相色谱分析

3．3 小结

第四章 猕猴桃皮渣多酚体外抗氧化活性研究

4．1 材料与方法

4．1．1 试验仪器与设备

4．1．2 试验试剂

4．1．3 试验方法

4．1．4 数据处理

4．2 结果与分析

4．2．2 ABTS+·自由基清除能力

4．2．3 ·OH清除能力测定

4．2．4 Cu2+还原能力测定

4．2．5 总抗氧化能力测定

4．2．6 铁离子还原能力(FRAP)测定

4．3 小结

5．1 结论

5．2 讨论

5．3 创新点

参考文献

致谢

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