热休克蛋白70基因转染对人心室肌细胞的保护作用乙醇预处理人心室肌细胞抗过氧化氢损伤的实验研究

摘要

全文共分三部分.第一部分,热休克蛋白70 (HSP70)基因转染对人心室肌细胞的保护作用.该研究用阳离子脂质体介导的基因转移技术,将人HSP70基因转入体外培养的人心室肌细胞 中,观察外源性HSP70基因表达及其对人心室肌细胞抗模拟缺血损伤能力的影响,探讨利用基因治疗手段保护人类心肌的可行性.结论:①该实验利用阳离子脂质体DOTAP介导的基因转移技术,使外源性HSP70基因在体外培养的人心室仙细胞中获得高水平表达;②经外源性HSP70基因转染的心室肌细胞在无应激因子作用时即可高水平表达HSP70,其抗模拟缺血损伤的能力与经热休克处理的心室肌细胞无显著差异,HSP70是热休克反应中起主要作用的介导因子;③该课题为利用基因转染的方法保护人心肌细胞提供了实验依据.第二部分,乙醇预处理人心室肌细胞抗过氧化氢损伤的实验研究.该研究用乙醇预处理体外培养的人心室肌细胞,观察HSP70表达及心肌细胞对过氧化氢损伤的耐受能力,并利用反义基因技术,探讨乙醇预处理心肌细胞抗过氧化氢损伤的机理.结论:①乙醇预处理可诱导体外培养的人心室肌细胞发生热休克反应,心室肌细胞中HSP70 mRNA和HSP70的表达水平上升.②心肌细胞经乙醇预处理24小时后,其抵抗过氧化氢损伤的能力明显提高.③利用反义基因片段阻断乙醇预处理诱导的HSP70表达,可取消其抗过氧化氢损伤能力,证明HSP70是乙醇预处理保护作用的主要介导因子.第三部分,人心室肌细胞的体外培养.该研究旨在建立人心室肌细胞原代培养、传代培养和鉴定的方法,为人类心血管疾病的研究提供理想的实验材料.结论:①人心室肌细胞的体外培养可采用消化法或贴块法进行.②原代培养取材以12~16周引产胎儿心肌为宜.③传代培养中应注意去除成纤维细胞的污染.④尽管存在表型变化,根据抗人肌红蛋白染色和CK-MB含量分析,培养细胞仍可作为心室肌细胞用于心血管疾病的实验研究.

目录

论文一热休克蛋白70(HSP70)基因转染对人心室肌细胞的保护作用

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

摘要

Abstract

论文二乙醇预处理人心室肌细胞抗过氧化氢损伤的实验研究

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

摘要

Abstract

论文三人心室肌细胞的体外培养

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

摘要

Abstract

综述一心血管外科疾病基因治疗的研究进展

综述二热休克蛋白心肌保护作用的研究进展

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