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丙型肝炎病毒糖蛋白在昆虫细胞中的表达及HCV感染者血清中抗E抗体的检测

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摘要

该研究构建了含HCV H株E基因5'端1575bp片段的杆状病毒转移载体E-BacPAK8,将其与BacPAK6线性DNA共转染昆虫细胞Sf9,获得重组病毒rE-Bac,用空斑滴定法纯化病毒,并感染Sf9进行蛋白表达.SDS-PAGE鉴定结果表明,HCVE基因在昆虫细胞中表达出多条蛋白带,其Mr分别为60 000、35000、33 000、26000和22000,Western blot结果显示,表达产物可与HCVRNA阳性感染者的血清发生反应,出现几条蛋白带.其中Mr为60000的是E<,2>,35 000~22 000的则可能是不同程度糖基化的E<,1>蛋白.应用表达的重组蛋白对HCV感染者血清中的抗E抗体进行了检测,结果总检出率为11.4﹪.其中,抗HCV核心抗体阳性的血清中抗E抗体检出率低于RNA阳性血清中抗E抗体的检出率.

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