核糖体蛋白质L15（RPL15）的高表达促进了胃癌细胞的增殖

摘要

背景: 胃癌是世界范围内第二常见的癌症死亡原因。环境和遗传因素在胃癌发生中都是很重要的因素。近年来，关于胃癌的分子特征的了解越来越多。同源染色体1，5，7，12，13和17位上杂合性的缺失(LOH)在胃癌中经常出现。基因的变化，致癌基因的激活和肿瘤抑制基因的失活在胃癌中经常可见。致癌基因c-ras，c-erbB-2，K-sam，c-met和c-myc的突变或者扩增以及肿瘤抑制基因p53，结肠腺瘤息肉基因(APC)，结直肠癌删除基因(DCC)和视网膜母细胞瘤基因(RBI)的失活被认为与胃癌的发生有关。这些基因可能是潜在的预测胃癌进展和转移的预后指标。 近来的研究显示基因表达模式的综合分析能从正常胃粘膜中识别胃癌的新的分子。这项技术也用来鉴别肿瘤亚群和鉴定与疾病分类、早期发现、预后以及胃癌进展有关的基因的表达。核糖体蛋白质是核糖体的组成成分，在DNA修复、凋亡、耐药、增殖中显示了不同的功能。在我们以前的研究中，我们比较了两种胃癌组织和同质的非肿瘤组织中基因的表达情况发现RPL15的表达水平在胃癌组织中比对照分别增加了2.8和4.7倍。RPL15还显示在一些食管肿瘤中也比正常同质组织中高表达。所以研究RPL15是否在胃癌中真正高表达和其在胃癌恶性表型中的作用是有意义的。在研究中，我们利用我们自己制备的多克隆抗体检测了RPL15在胃癌组织和胃癌细胞系中的表达，探讨了RPL15表达对于胃癌细胞系SGC7901的增殖的影响。 方法: 我们购买了Cybrdi公司的组织标本做RPL15的免疫染色，标本包括23张正常胃粘膜、胃腺癌和临近的非肿瘤组织的切片。我院普外科12名手术患者的胃癌和临近的非肿瘤组织用来做Westernblotting检测。我们构建了pSilencer-RPL15A和pSilencer-RPL15B质粒，并用pSilencer-RPL15A，pSilencer-RPL15B或者空载体pSilencer3.1转染SGC7901细胞，分别指定为SGC7901-L15AsiRNA，SGC7901-L15BsiRNA和SGC7901-pcDNA。通过westernblot分析转染后SGC7901细胞中RPL15水平，通过MTT和流式细胞分析研究了转染pSilencer-RPL15A后SGC7901细胞的增殖情况。并通过Westernblot研究细胞周期蛋白D1和B1与RPL15异位表达的关系。我们还通过软琼脂克隆基因分析和裸鼠皮下致瘤试验评价了转染后SGC7901细胞体内外致肿瘤性的变化。 结果: RPL15在胃癌组织中显著地高表达，而且RPL15在胃癌细胞系AGS，MKN45，MKN28，SGC7901和KATOⅢ中也高表达。通过转染siRNA载体抑制RPL15的表达明显地抑制了SGC7901细胞的生长，而且和细胞周期调节蛋白D1和B1的表达无关。下调RPL15的表达抑制了SGC7901细胞在软琼脂的生长和在裸鼠皮下的致肿瘤性。 结论: RPL15在胃癌组织和细胞系中高表达，在胃癌细胞的增殖中发挥着作用。所以RPL15可能是胃癌抗癌治疗的一个潜在的靶点。

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