MMP-2、MCP-1、E-Selectin、Aopps及p38MAPK信号通路与老年抑郁症之间的关系研究

摘要

背景：
　　抑郁症是综合多种因素作用引发的，且具有遗传倾向的慢性心理疾病，其主要临床症状为情绪低落或者悲观自责、兴趣缺失、有负罪感或无价值感，躯体症状可表现为睡眠紊乱、食欲减退、活动减少或注意力下降等，病程时间长且容易反复发作，对人们的身体及精神带来极大的伤害，已经成为21世纪的流行病。但其具体的发病机制并不十分清楚。近年来，越来越多的研究者们关注免疫系统之间的关系在抑郁症中的作用。有研究表明，抑郁症的发病机制之一是细胞因子引起的免疫功能紊乱，抑郁症患者细胞免疫功能和免疫细胞数目会发生改变。因此，细胞因子也逐步成为抑郁症研究的热点。
　　流行病学调查显示，疼痛和抑郁之间存在密切相关性，抑郁人群的疼痛发生率和疼痛人群发生率均高于各自单发生率，疼痛和抑郁的共患率平均为50％-60%。其中，抑郁和焦虑在人群中发病率为16%左右，但在慢性痛患者中有着更高的发病率约为35%。疼痛和抑郁常常共病，两者经常交叉重叠，共存时患者功能损害更大，生活质量更差。因此，治疗慢性病理性疼痛伴随抑郁的共病问题迫在眉睫。因此本文主要是通过蜜蜂毒引发慢性疼痛，进一步诱导抑郁的模型，来探讨抑郁症的发病机制，从而寻找抗抑郁治疗的策略，进而为临床进行抗抑郁治疗提供理论基础。
　　目的：
　　1.探讨免疫功能细胞因子MMP-2、MCP-1、E-Seletin、Aopps与老年抑郁症之间的关系
　　2.探讨PAK-ERK/p38 MAPK信号通路和抑郁之间的相关性关系
　　方法：
　　根据标准严格选取86例老年抑郁症患者与86例正常老年人。实验分为三组：正常组、抑郁症患者治疗前组、抑郁症治疗后组。所有人员均在清晨，空腹时收集静脉血。运用Western-blot蛋白印迹法检测MMP-2和MCP-1表达，ELISA和分光度计法检测E-selectin水平及AOPPs浓度变化。
　　清洁级成年Spragure-Dawley（SD）大鼠，大鼠抑郁模型建立为：足底给予蜜蜂毒注射，建立蜜蜂毒疼痛诱发抑郁模型。随机分为以下三组：
　　1.正常对照组（control）：在大鼠足底，我们注射50?l的0.9%的生理盐水，2小时后，在鞘内注射5?l的生理盐水；
　　2.蜜蜂毒模型组（BV+Veh）：大鼠足底，我们注射50?l的蜜蜂毒，浓度为4mg/ml，2小时后鞘内注射5?l的生理盐水；
　　3.药物处理组（BV+SB）：大鼠足底注射50?l的蜜蜂毒，2小时候鞘内注射5?l的SB203580，其浓度为1mg/ml。
　　快速断头取新鲜脊髓组织，提取蛋白质，通过western blot方法检测p21活化激酶（p21-activated kinase,PAK）、p38、细胞外信号调节激酶（extracellular signal-refulated kinase,ERK）的磷酸化水平。
　　结果：
　　1.免疫印迹的结果发现，与正常对照组相比，老年抑郁症组MMP-2、MCP-1表达升高，口服帕罗西汀14天后，其血清中MMP-2、MCP-1含量显著降低。
　　2.ELISA方法检测血清中E-selectin水平及AOPPs水平发现，与正常对照组相比，抑郁症患者血清中E-seletin及AOPPs含明显增加。当给予口服帕罗西汀治疗后，其水平显著降低。
　　3.研究发现，足底给予蜜蜂毒注射后，大鼠脊髓组织内PAK磷酸化水平升高，而当给予P38 MAPK信号通路抑制剂SB203580处理后，显著降低PAK的磷酸化水平。
　　4.免疫印迹结果发现，大鼠足底给予蜜蜂毒注射处理后，p38磷酸化水平增加，提示，蜜蜂毒可激活p38活性。当给予其抑制剂SB203580处理后，可显著降低p38的磷酸化水平。各组总p38的含量无明显变化，表明，SB203580处理不影响总p38的表达。
　　5.蛋白电泳可见，各组之间总ERK1/2的含量无明显变化，表明SB203580不影响脊髓ERK1/2的表达。与正常对照组相比，蜜蜂毒足底注射后显著上调ERK的磷酸化水平，提示，蜜蜂毒诱导的抑郁可增强ERK信号通路。值得指出的是：给予SB203580处理后，可显著下调ERK的磷酸化水平。
　　结论：
　　1.老年抑郁症发生后，免疫功能相关细胞因子激活；
　　2.慢性痛激活P38 MAPK信号通路，可能诱导抑郁症的发生。

目录

声明

缩略语表

前言

文献回顾

1 抑郁症的概述

2抑郁症的发病机制

3慢性疼痛与抑郁

4 p38 MAPK

第一部分：老年抑郁症患者治疗前后MMP-2、MCP-1、E-selectin及AOPPs变化的研究

1材料与方法

2实验方法

3结果

4讨论

第二部分：探讨PAK-ERK/p38 MAPK信号通路和老年抑郁之间的相关性研究

1材料与方法

2实验方法

3结果

4讨论

小结

1.本研究主要结论

2.本研究的创新性

3.研究不足

4.研究展望

参考文献

个人简历和研究成果

致谢