重组人肝细胞生长因子α链(rhHGFα)的高效表达、分离纯化与生物学活性研究

摘要

目的:1.筛选rhHGFα高达菌株、优化表达条件.2.建立rhHGFα分离纯化工艺.3.建立体外检测复性蛋白质活性的方法.结论:筛选得到的DH5α-rhHGFα高表达菌株和发酵工艺可以较好地提高rhHGFα工程菌菌体收率和目标蛋白的表达量,为进一步规模化生产奠定了基础.经分离纯化和体外共复性后HGF恢复了野生活性,证明了原核细胞表达出的未经糖基化的蛋白质也具有生物学活性,验证了利用原核基因工程在体外大量生产HGF这一技术路线的科学可行性.

目录

前言

一.重组人肝细胞生长因子α链高效表达菌株筛选

材料和方法

结果

讨论

二.重组人肝细胞生长因子α链表达体系研究

材料和方法

结果

讨论

三.重组人肝细胞生长因子α链分离纯化工艺研究

材料和方法

结果

讨论

四.复性和生物学活性测定

材料和方法

结果

讨论

小结

参考文献

综述

参考文献

致谢