纳络酮对小鼠海马CA1区神经元缺血再灌注损伤干预效果的观察

摘要

目的：进一步验证脑缺血再灌注损伤实验动物模型的可行性，初步探讨纳络酮再灌注后干预对脑缺血再灌注损伤的影响，探索脑缺血再灌注损伤时纳络酮后干预的最佳时机。 方法：将小鼠随机分为3大组9个小组，每小组6只：假手术组(A组)、缺血再灌注对照组(B组)和纳络酮后干预组(C组)，B组根据给药时间分为再灌注即刻(B1组)、再灌注30min(B2组)、再灌注1h(B3组)和再灌注1.5h(B4组)，C组也根据给药时间分为再灌注即刻(C1组)、再灌注30min(C2组)、再灌注1h(C3组)和再灌注1.5h(C4组)。C组腹腔注射纳络酮5mg/kg，B组0．9％NaCl以相应等体积量腹腔注射。采用昆明小鼠结扎双侧颈总动脉脑缺血再灌注损伤模型，各组再灌注24h后迅速开颅取脑。标本置于4％多聚甲醛液中固定24h后，取视交叉后的脑组织，常规石蜡包埋，冠状切片，片厚5μm，苏木精—伊红染色(HE染色)，分别观察纳络酮再灌注损伤后干预对海马CA1区神经元存活细胞数、变性细胞率和组织形态学改变的影响。 结果：纳络酮治疗组小鼠海马CA1区存活细胞数明显高于缺血再灌注对照组(P＜0．05)，变性细胞率明显低于缺血再灌注对照组(P＜0.05)，而与假手术组无显著差别(P＞0.05)，纳络酮治疗组各组内比较无显著差别。假手术组海马CA1区锥体细胞排列紧密，层次分明，核大而圆，核膜完整，核仁清晰，核染色质均匀；缺血再灌注对照组可见正常锥体细胞数明显减少，排列散乱，可见大量的变性坏死细胞，细胞肿胀，胞浆内有空泡形成，胞质嗜酸性增强，坏死细胞核呈梭形或三角形固缩，深染成蓝紫色，细胞间质水肿明显。纳络酮各组与缺血再灌注对照组比较变性坏死细胞明显减少，细胞形态接近正常，间质水肿得到改善。 结论：从形态学的角度，纳络酮后干预确实能减轻脑缺血再灌注损伤，纳络酮不同时间点的应用，都具有减轻损伤的作用，这就为临床超长心肺复苏提供了实验依据，在1.5小时内不同时间给予纳络酮的干预效果没有明显差别。

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结 论

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附 录 综述 纳络酮对脑缺血/再灌注损伤保护机制的研究进展

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