1.结直肠锯齿状病变中RUNX3的表达及其基因多态性的观察研究2.结直肠纤维绒毛锯齿状腺瘤的病理形态学及免疫组织化学特征

摘要

[背景与目的]
　　 锯齿状病变是一组以上皮呈锯齿状结构为特征的结直肠息肉／腺瘤,因其具有恶变为结直肠腺癌的潜能,近年来日益受到临床病理学工作者的关注。2010年新版WHO消化系统肿瘤分册将锯齿状息肉和息肉病明确分为增生性息肉(Hyperplasticpolyps,HPs),广基锯齿状腺瘤／息肉(Sessileserratedadenoma／polyp,SSA／P),传统锯齿状腺瘤(Traditionalserratedadenoma,TSA)三种类型。其中TSA和SSA具有明确恶变潜能,不同类型的HPs与也有类似于TSA及SSA的基因改变。锯齿状通路是一个多因素、多阶段、多基因改变渐进性累积的复杂过程,在此演变过程中涉及多种癌基因和抑癌基因,具体的发病机制迄今未完全明了。Runx转录因子3(Runt-relatedtranscriptionfactor3,RUNX3)基因是近年来新发现的一种抑癌基因,已被证实在多种人类肿瘤中存在RUNX3基因的异常。有研究发现RUNX3基因与人类消化系统肿瘤的发生关系更为密切,但是RUNX3基因在锯齿状病变发生和恶变过程中的作用尚不明确。
　　 RUNX3位于人类染色体的1p36.1,主要表达于消化道上皮细胞、血液细胞、间叶细胞、神经细胞等。已有研究证实RUNX3基因通过调节细胞周期和诱导细胞凋亡对肿瘤造成抑制,RUNX3基因的失活可能会造成癌症的发生。目前关于RUNX3在结肠癌中的作用已有不少文献,但有关RUNX3在锯齿状病变中作用的研究报告很少,国外Subramaniam等曾通过免疫组织化学方法比较发现HP和TSA中RUNX3的阳性表达较正常结肠组织和管状腺瘤(Tubularadenoma,TA)中有所下降,而国内尚没有对RUNX3在锯齿状病变中的研究报告。
　　 本研究通过观察锯齿状病变在RUNX3的免疫组织化学表达以及分析锯齿状腺瘤(Serratedadenoma,SA)中RUNX3(rs2236851,C／F)位点多态性,并观察上述两者的关系,从而对RUNX3在锯齿状病变发生与癌变途径中的作用进行初步探讨。
　　 [方法]
　　 收集北京军区总医院、海军总医院、解放军第二五二医院、河北省巨鹿县医院、北京中医药大学东直门医院2002年10月至2009年9月间病理论断为结直肠各类息肉和腺瘤切片共5347例,所有切片按WHO及文献标准,3名病理医师4-5轮阅片,从中筛选出锯齿状病变共258例。对上述258例锯齿状病变进行组织学诊断及分类,从中筛选出TSA32例,SSA／P8例,HP25例,并收集大肠癌(Colorectalcancer,CRC)20例、TA25例、正常大肠组织25例作为对照组,所有组织切片均进行免疫组织化学染色,观察RUNX3的表达情况。另从上述258例锯齿状病变中随机挑选出50例SA(包括TSA40例,SSA／P10例)作为实验组,并收集正常大肠组织20例作为正常对照组,运用PCR-SSP方法研究RUNX3(rs2236851,C／T)的多态性；并从SA实验组中随机抽取30例SA.进行免疫组织化学染色,运用IPP图像分析系统进行免疫组织化学阳性表达的半定量分析,分析基因型与RUNX3表达之间的关系。
　　 [结果]
　　 对RUNX3在正常组、TA组、HP组、TSA组、SSA组以及CRC组的免疫组织化学表达进行统计学分析,结果显示:RUNX3在TSA、SSA、大肠癌三组阳性率比正常对照组明显降低,差异具有统计学意义；RUNX3在SSA组与TA组之间、CRC组与TA组之间也具有统计学差异。TSA组与TA组之间虽然没有统计学差异,但TSA组RUNX3阳性表达率明显低于TA组。对RUNX3基因rs2236851位点多态性分析及IPP图像分析系统半定量分析显示:SA实验组T等位基因的频率明显高于正常对照组,RUNX3基因rs2236851位点可能与SA密切相关:分析SA基因型与RUNX3表达的关系发现。TC基因型SA患者的RUNX3阳性表达明显降低。
　　 [结论]
　　 1.免疫组织化学结果显示RUNX3在锯齿状病变中表达阳性率降低,提示其可能是SA发生和恶变过程中的必要条件。
　　 2.基因多态性分析结果提示RUNX3(rs2236851,C／T)位点可能与SA密切相关,TC基因型SA患者的RUNX3阳性表达降低更明显。