TLR4基因多态性及信号转导相关因子与军团菌感染的关系

摘要

目的：
　　 ①初步探讨TLR4基因(2244G→A)位点多态性与军团菌感染的关系。②了解MyD88 mRNA表达与军团菌感染的关系；探讨TLR4基因(2244G→A)位点基因多态性与MyD88 mRNA表达的关系。③了解IFN-β、IL-10与军团菌感染的关系；探讨TLR4基因(2244G→A)位点基因多态性与IFN-β、IL-10表达的关系。
　　 方法：
　　 ①采用聚合酶链反应（PCR）扩增肺部感染患者尿液中军团菌属特异性16SrRNA基因，酶免疫检测法(EIA)检测其尿液中血清1型嗜肺军团菌抗原（Lp1尿抗原），军团菌感染的判定标准为Lp1尿抗原阳性或16SrRNA基因扩增阳性。
　　 ②采用PCR-RFLP 技术检测25例军团菌感染者、66例其它非革兰氏阴性菌引起的肺部感染者（病人对照组）、102例健康体检者的TLR4基因(2244G→A)位点多态性。
　　 ③采用real-time RT-PCR 方法检测军团菌感染组、病人对照组和健康人对照组MyD88 mRNA的表达水平，分析PBMC中MyD88 mRNA与军团菌感染的关系及TLR4基因（2244 G→A）位点基因多态性与MyD88 mRNA表达的关系。
　　 ④采用ELISA 法检测军团菌感染组、病人对照组和健康人对照组IFN-β、IL-10浓度，分析IFN-β、IL-10与军团菌感染的关系及TLR4基因(2244G→A)位点基因多态性与IFN-β、IL-10的关系。
　　 结果：
　　 ①健康人对照组TLR4 (2244G→A)位点A等位基因发生频率（44.6％）高于病例组（34％）和病人对照组（36.4％），差异无统计学意义（χ 2=3.243，p=0.198）。
　　 病例组、病人对照组、健康人对照组TLR4 (2244G→A)位点三种基因型频率差异无统计学意义（χ 2=6.003，p=0.199）；TLR4 (2244G→A)位点GG/ GA和AA基因型频率在三组分布差异未发现统计学意义（p=0.076），健康人对照组与病例组比较TLR4 (2244G→A)位点GG/GA和AA基因型频率分布差异有统计学意义（p=0.044），AA基因型在健康人对照组的发生频率比病例组高。
　　 ②病例组、病人对照组、健康人对照组三组人群PBMC中MyD88 mRNA的表达量差异有统计学意义（F=6.625, p=0.002）；病人对照组MyD88的表达量高于健康人对照组，差异有统计学意义(p=0.000)，病例组MyD88的表达量高于健康人对照组，但未出现统计学差异（p=0.095），病例组和病人对照组MyD88的表达量差异无统计学意义（p=0.436）；病例组、病人对照组、健康人对照组TLR4(2244G→A)位点三种基因型间MyD88 mRNA表达量差异均未发现统计学意义（p=0.408，p=0.235，p=0.174）；病人对照组、健康人对照组中AA基因型组MyD88mRNA表达量高于GG/GA基因型组，但未出现统计学意义（Z=-1.461, p=0.144；Z=-1.791, p=0. 073）。
　　 ③病例组、病人对照组、健康人对照组三组人群IFN-β浓度差异有统计学意义（F=12.884，p=0.000），病例组和病人对照组IFN-β浓度均高于健康人对照组，差异均有统计学意义(p=0.001, p=0.000），病例组和病人对照组IFN-β浓度差异无统计学意义（p=0.982），病例组和病人对照组IL-10浓度与健康人对照组比较均有不同程度的升高，但未出现统计学意义（F=1.835,p=0.166）；病例组，病人对照组，健康人对照组三种基因型间IFN-β、IL-10浓度差异无统计学意义（p=0.506， p=0.497， p=0.260；p=0.399, p=0.1, p=0.223），病人对照组、健康人对照组中AA基因型组IFN-β浓度低于GG/GA基因型组，但未出现统计学差异（Z=-1.155,p=0.248；Z=-1.617,p=0.106）,病人对照组AA基因型组IL-10浓度高于GG/GA基因型组，差异有统计学意义（Z=-2.132,p=0.032），健康人对照组AA基因型组IL-10浓度高GG/GA基因型组，但未出现统计学差异（Z=-0.981,p=0.326）。
　　 结论：
　　 ①TLR4 (2244G→A)位点GG/GA与AA基因型频率在三组分布有差异，健康人对照组AA基因型发生频率高于病例组，提示TLR4 (2244G→A)位点多态性与军团菌感染易感性可能有关。
　　 ②病例组和病人对照组PBMC中MyD88的表达量高于健康人对照组，提示军团菌感染及其他非革兰氏阴性菌感染可能引起MyD88 mRNA表达升高；病人对照组、健康人对照组中AA基因型组MyD88 mRNA表达量高于GG/GA基因型组，提示TLR4 （2244 G→A）位点基因多态性与MyD88 mRNA表达可能有关。
　　 ③病例组和病人对照组IFN-β浓度均高于健康人对照组，病例组和病人对照组IL-10浓度与健康人对照组比较均有不同程度的升高，提示军团菌感染及其他非革兰氏阴性菌感染后可能上调了IFN-β和IL-10的表达；病人对照组、健康人对照组AA基因型组IFN-β浓度低于GG/ GA基因型组，而AA基因型组IL-10浓度高于GG/ GA基因型组，提示TLR4 （2244 G→A）位点基因多态性与IFN-β和IL-10可能有关。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:常用缩写词中英文对照表

声明

前 言

第一章 TLR4基因多态性与军团菌感染易感性的关系

第二章 TLR4(2244G→A)位点多态性与MyD88 mRNA表达的关系

第三部分 TLR4(2244G→A)位点多态性与IFN-β、IL-10的关系

小结及研究特色

参考文献

综述正文 TLR4及其基因多态性与常见病原体感染关系的研究进展

个 人 简 历

致 谢