BMP-2和BMP-4在外源性Noggin模型大鼠再生肝的表达及意义

摘要

目的：通过外源性Noggin的干预，探讨BMP-2和BMP-4对大鼠肝大部切除后肝再生过程的影响。
　　 方法：80只成年健康雄性Wistar大鼠随机分为四组，取8只大鼠作为正常对照组(NormalControl，NC)即Oh组，余72只采用Higgins[1]经典方法制作肝大部切除(partialhepatectomy，PH)模型，模型鼠随机分为生理盐水组(NormalSodium，NS，n=24)、Noggin低剂量组(NogginLow，NL，n=24)和Noggin高剂量组(NogginHigh，NH，n=24)。通过测量大鼠术前、术后12h、48h、72h的体重以及切除肝重，观察模型鼠各组在PH后12h、48h、72h各时间点肝再生率的变化，并采用免疫组织化学染色的方法观察0h、12h、48h、72h各时间点再生肝组织中BMP-2和BMP-4的表达。
　　 结果：
　　 1.PH术后0-72h间模型鼠各组肝再生率均表现出逐渐增高的趋势，12h时间点NS组的肝再生率较NL、NH组高（P＜0.01），而NL、NH组间肝再生率无显著性差异(P＞0.05),48h、72h时间点三组间肝再生率差异均无统计学意义（p＞0.05）。
　　 2.模型鼠各组肝组织中BMP-2的表达在Oh表达一致，在肝大部切除术后12h时间点各组BMP-2的表达均降至最低，该时间点NS组BMP-2的表达较NL、NH组高(P＜0.01)，NL组BMP-2的表达较NH组高(P＜0.01)。PH术后48h时间点模型鼠各组再生肝组织中BMP-2的表达较各自12h时间点高但仍低于各自72h时间点的表达（P＜0.01），该时间点NS组BMP-2的表达明显较NL、NH组高(P＜0.01)，而NL、NH组间BMP-2的表达无显著性差异（p＞0.05）。PH术后72h时间点模型鼠各组再生肝组织中BMP-2的表达最高但仍小于正常组的表达(P＜0.01)，该时间点NS组BMP-2的表达明显较NL、NH组高（P＜0.01），而NL、NH组间BMP-2的表达无显著性差异（p＞0.05）。
　　 3.模型鼠各组肝组织BMP-4的表达在Oh表达一致，在PH术后12h降低，均于PH术后48h降至最低后开始回升，PH术后72h模型鼠各组再生肝组织中BMP-4的表达继续回升但仍小于正常对照组的表达，组间差异有统计学意义(P＜0.01)，在PH术后12h、48h、72h各时间点NS、NL、NH组间BMP-4的表达有显著性差异(P＜0.05)。
　　 4.PH术后NS、NL、NH各组再生肝组织中BMP-2灰度值分别与各自肝再生率呈负相关(rNS=-0.853,P＜0.01;rNL=-0.780,P＜0.01;rNH=-0.872,P＜0.01)。
　　 5.PH术后NS、NL、NH各组再生肝组织中BMP-4灰度值分别与各自肝再生率无相关性(rNS=0.169,P＞0.05;rNL=0.350,P＞0.05;rNH=0.218,P＞0.05)。
　　 结论：
　　 1.BMP-2对肝再生起负反馈调节作用，它在残余肝脏再生初期急剧减少以减弱对肝再生的抑制作用，而随着肝再生的进展，BMP-2逐渐回升以阻止肝细胞无休止的增殖。
　　 2.BMP-2对肝脏再生的负反馈调节作用与BMP-2的浓度有关，可能有一剂量浓度限制或范围。
　　 3.BMP-4在肝再生过程中起调节作用，可能参与肝非实质细胞、肝索形成及完成肝脏塑形的过程。

目录

声明

摘要

正文

前言

材料和方法

1.实验动物

2.实验模型及标本制备

3.主要试剂

4.主要设备

5.检测方法

6.结果判定

7.统计学处理

结果

1.肝再生率的测定

2.BMP-2免疫组化染色结果

3.BMP-4免疫组化染色结果

4.再生肝组织中BMP-2和BMP-4的表达与肝再生率的相关关系

讨论

1.肝脏再生的机理

2.Noggin和BMPs家族的关系

3.BMP-2在肝再生过程中的作用及意义

4.BMP-4在肝再生过程中的作用及意义

结论

参考文献

附图

综述

个人简历

致谢