CD19+CD5+IL--10+B细胞在系统性红斑狼疮患者中的表达及发病机制的影响

摘要

背景：系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)是一种由多因素参与的以多脏器受累为特征的自身免疫性疾病，免疫功能紊乱贯穿其整个发病过程。到目前为止，免疫异常的机制仍未阐明。以往的研究认为，B细胞在自身免疫病的发生、发展中扮演致病性角色。新近研究显示，B细胞也参与机体免疫应答的调节，在自身免疫病过程中起免疫抑制作用，这种具有保护作用的抑制免疫应答炎性反应的B细胞亚群被命名为调节性B细胞(regulatory B cell，Bregs)。 在此之前，调节性T细胞(regulatoryT cells，Treg)的负向调节功能一直是人们的研究热点，但是对于机体免疫调节所必不可少的B细胞，我们认为B细胞发挥正向免疫调节功能，但是近来人们逐渐发现B细胞与调节性T细胞一样具有负向免疫调节功能。本研究将对系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、干燥综合征患者及正常人外周血淋巴细胞进行体外刺激、培养，分析并比较系统性红斑狼疮患者与类风湿关节炎、干燥综合征患者及正常人CD19+CD5+IL-10+B细胞的表达差异，并探讨CD19+CD5+IL-10+B细胞的表达与系统性红斑狼疮的相关性。 目的： (1)比较SLE患者与RA患者、SS患者及正常对照组CD19+CD5+IL-10+B细胞的表达，初步探讨CD19+CD5+IL-10+B在自身免疫病中的作用; (2)比较活动期SLE患者与非活动期SLE患者CD19+CD5+IL-10+B细胞的表达，分析CD19+CD5+IL-10+B细胞在不同活动期SLE患者中的变化; (3)CD19+CD5+IL-10+B细胞与SLE疾病活动的相关性分析; (4)比较VCR联合CTX治疗前后SLE患者CD19+CD5+IL-10+B细胞的表达差异。 方法：选取2011年6月至2013年1月在山西医科大学第二医院风湿科就诊SLE患者50例，诊断均符合1997年修订的美国风湿病学会(American College ofRheumatology，ACR)分类标准。签署知情同意书。收集SLE患者一般情况和临床资料，根据SLE疾病活动指数(systemic lupus erythematosus disease activityindex，SLEDAI)积分评估疾病的活动性。同时选取RA活动期患者、SS患者及正常对照组各10名，均不符合SLE诊断标准;试验在获得研究对象知情同意后，抽取外周静脉血。 流式细胞术检测入组的SLE患者及正常对照者外周血CD19+CD5+IL-10+B淋巴细胞的百分数，分析其比例及变化。 采用SPSS17.0统计软件分析。 结果： 1.SLE患者、RA患者、SS患者及正常对照组CD19+CD5+IL-10+B细胞及其亚型的比例 (1)流式细胞术检测CD19+CD5+B淋巴细胞比例显示SLE患者与正常人分别为(5.99±2.65)％和(19.08±2.92)％，两组比较差异有统计学意义(P＜0.01);SLE患者与RA患者分别为(5.99±2.65)％和(18.49±6.74)％，两组比较差异有统计学意义(P=0.002);SLE患者与SS患者分别为(5.99±2.65)％和(17.51±2.37)％，两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。 (2)流式细胞术检测CD19+IL-10+B淋巴细胞比例显示SLE患者与正常人分别为(3.96±2.14)％和(9.07±2.37)％，两组比较差异有统计学意义(P=0.01);SLE患者与RA患者分别为(3.96±2.14)％和(11.05±4.81)％，两组比较差异有统计学意义(P=0.002);SLE患者与SS患者分别为(3.96±2.14)％和(7.23±2.19)％，两组比较差异有统计学意义（P=0.002）。 (3)流式细胞术检测CD19+CD5+IL-10+B淋巴细胞比例显示SLE患者与正常人分别为(2.38±1.51)％和(7.86±1.82)％，两组比较差异有统计学意义(P=0.022);SLE患者与RA患者分别为(2.38±1.51)％和(8.23±4.86)％，两组比较差异有统计学意义(P=0.002);SLE患者与SS患者分别为(2.38±1.51)％和(6.29±1.94)％，两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。 2.SLE活动期患者与非活动期患者CD19+CD5+IL-10+B细胞及其亚型的比例 (1)流式细胞术检测CD19+CD5+B淋巴细胞比例显示SLE活动期患者与非活动期患者分别为(3.99±1.39)％和(7.71±2.15)％，两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。 (2)流式细胞术检测CD19+IL-10+B淋巴细胞比例显示SLE活动期患者与非活动期患者分别为(2.71±2.14)％和(5.22±2.12)％，两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。 (3)流式细胞术检测CD19+CD5+IL-10+B淋巴细胞比例显示SLE活动期患者与非活动期患者分别为(1.76±1.08)％和(3.28±1.66)％，两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。 3.SLE患者CD19+CD5+IL-10+B细胞与SLEDAI评分、ESR及补体的相关性活动期SLE患者CD19+CD5+IL-10+B细胞与SLEDAI评分呈负相关(r=-0.645，P＜0.01);与ESR呈负相关（r=-0.526，P＜0.05）;与补体C3呈正相关(r=0.435，P=0.03);非活动期SLE患者CD19+CD5+IL-10+B细胞与SLEDAI评分呈负相关（r=-0.627，P=0.001）;与ESR呈负相关（r=-0.497，P=0.001）;与补体C3呈正相关（r=0.922，P=0.001）。 4.VCR联合CTX治疗前后SLE患者CD19+CD5+IL-10+B细胞及其亚型的变化 (1)流式细胞术检测CD19+CD5+B淋巴细胞比例显示VCR联合CTX治疗前后分别为(3.87±1.67)％和(7.63±1.67)％，两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。 (2)流式细胞术检测CD19+IL-10+B淋巴细胞比例显示VCR联合CTX治疗前后分别为(2.19±1.07)％和(4.47±1.63)％，两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。 (3)流式细胞术检测CD19+CD5+IL-10+B淋巴细胞比例显示VCR联合CTX治疗前后分别为(0.96±0.47)％和(2.64±1.01)％，两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。 结论： 1.SLE患者CD19+CD5+IL-10+B细胞明显低于RA、SS患者及正常对照组，提示CD19+CD5+IL-10+B细胞在SLE发病中起着重要作用。 2.SLE活动期患者CD19+CD5+IL-10+B细胞明显低于非活动期患者，提示随着CD19+CD5+IL-10+B细胞的升高，SLE患者疾病活动度明显下降。 3.活动期与非活动期SLE患者CD19+CD5+IL-10+B细胞均与SLEDAI评分、ESR呈正相关，与补体C3呈负相关，提示CD19+CD5+IL-10+B细胞的变化影响疾病活动。 4.VCR联合CTX治疗后，SLE患者CD19+CD5+IL-10+B细胞明显升高，提示VCR联合CTX可以调节CD19+CD5+IL-10+B细胞，改善病情。

目录

声明

缩略词表

摘要

前言

一、长春新碱周期联合环磷酰胺治疗系统性红斑狼疮提出背景

二、Breg细胞发现

三、Breg细胞的功能及作用

四、Breg在系统性红斑狼疮中的作用

参考文献

第一部分 CD5+IL-10+CD19+B细胞及其亚型在不同自身免疫性疾病中的研究

一、研究对象

二、材料方法

三、结果

讨论

参考文献

第二部分 系统性红斑狼疮患者中CD19+CD5+IL-10+B细胞的研究

一、研究对象

二、材料方法

三、结果

讨论

参考文献

第三部分 CD19+CD5+IL-10+B细胞与系统性红斑狼疮疾病活动性的相关性研究

一、研究对象

二、临床评分系统

三、材料方法

四、结果

讨论

参考文献

第四部分 VCR联合小剂量CTX治疗对SLE患者CD19+CD5+IL-10+B细胞的影响

一、研究对象

二、材料方法

三、结果

讨论

参考文献

综述 Breg细胞在系统性红斑狼疮发病中作用机制及最新进展

个人简历

致谢