二甲双胍在3T3-L1前脂肪细胞诱导过程中对v-SNAREs蛋白家族mRNA表达的影响

摘要

目的：
　　通过观察3T3-L1前脂肪细胞诱导分化过程中二甲双胍对v-SNAREs mRNA表达变化，探讨二甲双胍在GLUT4转运中的作用机制。
　　方法：
　　购买3T3-L1前脂肪细胞进行培养，当细胞生长至融合度达到100％或过融合时开始诱导，予以诱导液诱导分化，A液3天、B液1天，交替3次，共12天，在诱导过程中，分别给予不同浓度二甲双胍（0、0.5、1、2mmol/L)持续干预，第12天收集标本。诱导成脂通过油红O染色鉴定。运用RT-PCR技术检测脂肪细胞中AMPK、GLUT4、VAMP2、3、4、5、7、8的mRNA水平。实验数据应用SPSS13.0软件进行统计分析，组间差异采用单因素方差分析，组间多重比较用LSD检验，检验水准取?=0.05。
　　结果：
　　AMPK、VAMP4、VAMP7 mRNA结果以单因素方差分析无统计学意义。GLUT4、VAMP2、3、5、8 mRNA结果以单因素方差分析达统计学意义，再行LSD检验结果：1）与0mmol/L组相比，0.5mmol/L组GLUT4、VAMP2、3、8 mRNA水平无统计学差异（P＞0.05）；2）与0mmol/L组相比，1mmol/L组GLUT4、VAMP2、3、8 mRNA水平上调，差异达统计学意义（P＜0.05）；3）与1mmol/L组相比，2mmol/L组GLUT4、VAMP2、3、8 mRNA水平下调，差异有统计学意义（P＜0.05）。
　　结论：
　　二甲双胍可以作用于前脂肪细胞诱导分化过程中，在1mmol/L浓度范围内，随着二甲双胍浓度增加，可以上调脂肪细胞中GLUT4、VAMP2、3、8 mRNA的表达，且具有一定的剂量依赖效应。1mmol/L可能是二甲双胍在3T3-L1前脂肪细胞作用的最大浓度。二甲双胍可能通过调节v-SNAREs蛋白家族发挥对脂肪细胞GLUT4的转运的调控。当二甲双胍浓度达到2mmol/L，则下调脂肪细胞中GLUT4、VAMP2、3、8 mRNA的表达。本实验为进一步探索二甲双胍在GLUT4转运中的具体作用机制提供理论依据。
　　本课题为国家自然科学基金“V-SNAREs在二甲双胍调控脂肪细胞GLUT4转运中的作用（编号：NSFC81270882）”。